一种新型的细胞房消毒方案

关键词：实验室污染  支原体污染  细胞房污染
一、首先我们先来普及一下细胞房常见的污染分类如下：
1细菌污染
特征：大小在0.5~5 μm，比动物细胞小很多。多呈球状或杆状，形态规则，分布均匀；增殖速度快，一般污染后48~72小时爆发式增殖；营养消耗快，培养基很快变黄，变浑浊；镜下观察有明显的定向运动。
处理方法：轻度污染可用10X双抗清洗处理，重度污染建议消杀后丢弃。
2真菌污染
特征：呈链球状或丝状。常形成肉眼可见的菌落，培养基颜色无变化或变紫，仅对局部细胞影响较大，其他地方生长正常。会形成孢子，容易污染其他细胞。
处理方法：真菌污染较难根除，不建议保留，建议消杀后丢弃。
3支原体污染
特征：最小的微生物，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。感染支原体的细胞，在某一时间点碎片突然增多，随着传代，细胞状态显著变差。支原体污染可通过气溶胶传播，影响同一细胞房其他细胞。
鉴定方法：PCR法、显色法、荧光染色法等。
处理方法：若细胞状态尚可，添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。
4黑胶虫污染
特征：无明确定义，镜下无法直接观察到。主要表现为细胞状态差，黑点和碎片多，布朗运动。通过检测发现主要为支原体污染，部分为未知的增殖不明显的微生物污染。
处理方式：若细胞状态尚可，添加黑胶虫/支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。
5细胞交叉污染
特征：即不同的细胞混杂在一起
鉴定方法：
同种属：STR鉴定，多等位基因数大于3个。
（需考虑本身的遗传背景，如EA.hy 926为融合细胞，本身就包含两套遗传信息）
不同种属：PCR法，对种属特异性基因进行扩增，不同种属产物大小不同。
处理方法：建议重新引种。

二、细胞污染后的处置
细胞一旦发现有污染出现，应及时对所用试剂和耗材进行清理。耗材可更换新的或者重新高压灭菌，试剂可重新过滤除菌或者更换新批次，操作台和细胞房需用消毒液进行全面清洁消杀后方可复苏新的细胞，以免反复出现污染。
污染防治策略
环境要求：
洁净区10000级，局部100级，定期进行沉降菌检测
环境消毒：每周一次定期消毒灭菌
1） 地面/墙面：84消毒液、新洁尔灭交叉使用，或采用杀孢子剂进行喷洒
2） 环境消毒：定期紫外照射，臭氧熏蒸，采用杀孢子进行空间雾化
3） 仪器设备表面：75%酒精擦拭，或采用杀孢子剂进行喷洒
推荐一种细胞房针对细菌，真菌，孢子污染的快速清除剂，诺福细胞房除菌剂:是专门用于清除细胞房中细菌、直菌、支原体等微生物清除的一款产品，经多项独立试验验证表明对影响诺福细胞房除菌剂，对细胞培养的各类细菌、直菌、支原体等微生物均有清除的效果，尤其对暴露在空气中的细菌、真菌及其芽孢和孢子抑制可长达7-10天，可快速清除。主要成分高纯度过氧化氢活性胶纸银离子，
 

特性优势:
广谱性--对病毒、细菌、支原体、直菌、霉菌均有清除作用;
安全性--具备无致畸性  无刺激性 无毒性第三方检测报告，使用安全
针对性--专门用于细胞房及实验室内，3-5分钟内快速清除微生物污染:理化性质--无刺激性，无腐蚀性，稳定性好，可完全降解:可以喷洒，雾化，熏蒸，操作方便，不会出现细菌耐药性等问题。
诺福细胞房除菌剂使用说明:
(1)请佩戴彩胶手套操作:
(2)在细胞房及实验室空间，喷两层即可快速杀灭常见污染源
(3)喷洒本品后，需将细胞房或实验室密闭30分钟后使用
(4)诺福细胞房除菌剂建议每1-2周至少处理一次