Green DND-26（溶酶体绿色荧光探针）

DND-26,溶酶体绿色荧光探针（LysoTracker Green DND-26）为绿色荧光标记的溶酶体探针，可对活细胞中的酸性隔室进行染色，并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中.具有504/511nm的最大激发/发射波长。

LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料，该类探针具有几大重要的特点：

• 选择性标记酸性细胞器；

• 纳摩尔级（nM）浓度即可有效标记活细胞；

• 具有多色探针提供，可根据情况对样品进行多标实验。

LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度为50-75nM；
【注意】：为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。