糖基化，尤其是N-糖基化修饰是生物体调控蛋白质在组织和细胞中的定位、功能、活性、寿命和多样性的一种普遍的翻译后方式。N-糖基化位点研究是理解糖链功能的重要前提之一。在N-糖基化相关的信息中，发生N-糖基化的位点是我们理解其糖链功能的基础。除了传统生物化学中应用点突变等方法对糖基化位点进行研究，生物质谱技术也在N-糖基化位点的鉴定中发挥了重要作用。MALDI TOF MS及nano LC-ESI-MS/MS常用于抗体中N-/O-糖基化位点的鉴定。

糖基化位点鉴定过程

（1） 使用trypsin或其他适当的蛋白酶对样品进行酶切；
（2） 选取合适的色谱柱对N-glycopeptides, O-glycopeptides及其他多肽进行分离；
（3） 脱糖基化处理；
（4） 通过MALDI-TOF MS, ESI-MS或MS/MS 对多肽图谱进行分析，找出糖基化的理论位置；
（5） 通过多肽图谱确定每一个N-/O-糖原的位点；
（6） 对不同批次样品的糖基化位点进行比对。