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ITC测试是什么

2023-09-14 15:40 作者:sousepad材料检测  | 我要投稿

等温滴定量热(Isothermal Titration Calorimetry,简称ITC)是一种广泛应用于生物化学和药物研究领域的实验技术。它通过测量溶液中的热量变化,探究溶质与溶剂之间的相互作用。

        ITC测试原理基于热力学法则,即溶液中的热量变化与化学反应或相互作用有关。仪器包含一个参照池和一个样品池。参照池通常加入纯水,样品池加入待研究对象中的一种(一般为大分子,如蛋白质),而滴定器里则装有另一种研究对象称之为配体(例如化合物)。在实验过程中,配体被可控地滴入样品池中(同时伴随充分混合),一般为0.5到2μL,直到样品池中的配体浓度2-3倍过量于样品池中的蛋白浓度。每次滴定会产生一个热量脉冲,通过对每一次滴定时热量的积分并对浓度进行归一化处理后生成摩尔放热量(kcal/mol)对摩尔比率(配体/样品)作图,再选择拟合合适的结合模型(Binding Models),获取结合相关的亲和力 (KD)、化学结合计量比 (n)、焓变 (ΔH) 和熵变 (ΔS)。

        在ITC实验中,溶液的温度变化被转换为功率曲线,曲线上的峰值表示热量变化最大的点。通过分析这些峰值的形状、位置和面积,可以获得关于溶质与溶剂相互作用的信息。例如,如果峰值位于注入量为零时刻,且峰值面积与注入量成正比,说明溶质与溶剂之间存在明显的结合作用。

        ITC技术的优势在于它可以直接测量溶液中的热量变化,无需事先了解溶质的结构或性质。因此,ITC能够提供一种全面、定量的方法来研究溶质与溶剂之间的相互作用。与其他常用的结构分析技术相比,ITC测试可以在溶液中进行,无需晶体化或标记化处理,因此更加便捷和灵活。

        ITC技术在生物化学和药物研究中具有广泛的应用。例如,研究蛋白质与配体之间的结合作用、药物与靶点之间的相互作用、酶促反应的热效应等。通过ITC实验,可以获得关于这些相互作用的定量信息,从而帮助研究人员理解生物体系中的化学过程,并为药物设计和优化提供重要的指导。

        总之,等温滴定量热技术是一种基于热力学原理的实验技术,通过测量溶液中的热量变化,揭示了溶质与溶剂之间的相互作用。它在生物化学和药物研究中具有广泛的应用前景,为我们深入了解生物体系的化学过程提供了重要的工具和方法。

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