技术分享 | 基因干扰研究工具（上）

背景介绍

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的转录或翻译来抑制基因表达。

由于RNAi具有高度的序列专一性，可以特异地沉默基因，从而获得基因功能丧失或基因表达量的降低。

基因干扰有哪些应用呢？

01

基因功能研究

RNAi具有高效特异性抑制基因表达的特点，运用病毒载体介导shRNA干扰可以调控基因表达，进而研究基因功能

02

信号通路研究

可以运用该技术进行体内体外相关信号通路及作用机制的研究

03

构建疾病模型

通过病毒载体介导shRNA干扰可构建转基因抑制小鼠模型

04

基因治疗

RNAi被用于基因表达异常升高引起的疾病，如肿瘤和病毒感染等

05

药物开发

利用RNAi特异性高效地抑制基因的表达，获得基因功能抑制表型，进而大规模地筛选出基因靶点，从而实现短时间内药靶在细胞水平和动物水平的筛选和评定。

常用的基因干扰工具及区别

常见的干扰工具包括化学合成的双链小干扰RNA(siRNA)、基于载体的短发夹RNA(shRNA)。

siRNA简介

siRNA(Small interfering RNA；short interfering RNA；silencing RNA) 是化学合成的小分子，导致基因沉默和序列特异性RNA降解的重要中间媒介，具有特殊的结构特征即5'端磷酸基团和3'端羟基，其两条链的3'端各有两个碱基的游离，通过与目标mRNA特异性互补结合降解mRNA。

吉满生物可根据客户提供的目的基因信息，设计并合成siRNA,也可以根据实验需求，提供多种荧光标记和化学修饰的siRNA。

吉满生物siRNA合成服务

shRNA简介

小发卡RNA(a small hairpin RNA；short hairpin RNA, shRNA)是一段具有紧密发卡环的RNA序列，shRNA包括两个短反向重复序列，可以克隆至shRNA表达载体，后通过质粒转染或病毒转导引入细胞，在细胞中经酶切形成siRNA，用于沉默靶基因的表达。

shRNA的特点

01

靶向性强

理论上，shRNA能够对目标基因进行特异性的抑制，而不影响其他基因的表达，在基础研究和临床治疗中有着广泛的应用前景。

02

适用范围广

shRNA可以用于多种类型的细胞和生物体系中，并且能够针对多种不同的基因进行沉默。因而使得shRNA成为了研究和治疗各种疾病的重要手段。

03

操作简单

与其他基因敲除技术相比，shRNA的设计、合成和操作相对简单。通常只需要将shRNA序列克隆到质粒或病毒载体中，然后导入到细胞内即可实现基因沉默效应。

04

抑制效果持久

shRNA可以在细胞内诱导长期的基因沉默效应，其抑制效果可以持续几天甚至数周。这种特点使得shRNA成为了研究和治疗需要长期监测的疾病的重要工具。

05

可视化的细胞转染效率

通过与荧光蛋白如GFP共表达，可以快速筛选质粒转染或病毒感染阳性的目的细胞，大大提高筛选效率。

常见的shRNA干扰载体除了质粒表达载体外，还有病毒载体，包括慢病毒载体(LV)、腺病毒载体(AV)、腺相关病毒载体(AAV)等。

吉满生物shRNA载体构建服务

吉满生物拥有丰富的载体构建经验，有普通载体和病毒载体可供选择。吉满生物可为科研人员提供编码基因以及非编码基因(circRNA,lncRNA和microRNA）的干扰服务。

01

服务优势

高效的载体构建策略、优惠的产品价格、测序验证100%正确

02

服务流程

除了提供以上常见的基因干扰工具外

吉满还能提供一系列基因干扰相关的特色服务

因篇幅有限

特色服务内容将在下篇详细介绍

敬请关注！

吉满生物科技（上海）有限公司成立于2011年，是专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。以病毒包装为基础，密切关注行业最前沿的科研进展，十二年深耕细作，创建了具有自主知识产权的分子生物学、细胞生物学、慢病毒、腺相关病毒、报告基因、抗体表达六大技术平台。

2020年成立了专业细胞系子品牌DDXCELL，提供报告基因检测、病毒包装、工程细胞株构建，基因编辑及药物筛选评价等技术服务及相关产品。

2022年载体品牌“载体通·Genovector”焕新升级，同时推出全新试剂品牌“优试剂·Genoagent”，贯穿科研始末。

吉满可为客户提供几千种的现货载体和一站式定制服务。