Western Blot -wb蛋白实验没有阳性条带的原因

（1）抗体染色不充分

增加抗体浓度，延长孵育时间。

（2）酶失活

直接将酶和底物进行混合，如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物。

（3）标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低

设置阳性对照，如果阳性对照有结果，但标本没有则可能是标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低。可考虑增加标本上样量解决靶蛋白含量低的原因。

（4）试剂不匹配

一抗与组织种属，一抗与二抗或/和底物与酶系统之间不匹配。通过设置内参照可以验证二级检测系统的有效性。

（5）一抗失效

选择在有效期内抗体；并选择现配现用的工作液。

（6）HRP抑制剂

所用溶液和容器中避免含有叠氮化钠。