HCX-0050艾美捷人因子Ⅹ解决方案

因子X是一种维生素k依赖性蛋白酶原，在肝脏中合成，并以二硫键连接的双链分子形式在血浆中循环。在进入血浆之前，后翻译修饰产生11个γ-羧基谷氨酸(gla)残基和一个b-羟基天冬氨酸残基，这些残基位于nh2末端轻链内。轻链还包含两个表皮生长因子(EGF)同源结构域。因子X的cooh末端重链包含大部分的碳水化合物部分，以及潜在的丝氨酸蛋白酶结构域。因子X的活化是由内在因子Xase复合物(因子IXa、因子VIIa、细胞表面和钙离子)或外在因子Xase复合物(因子VIIa、组织因子、细胞表面和钙离子)催化的。任何一种复合物激活人因子X都会导致cooh末端重链Arg52-Ile53的裂解，随后释放52个氨基酸的激活糖肽。然后，Xa因子作为凝血酶原复合物的酶组分，负责将凝血酶原快速转化为凝血酶。玻璃残基使因子X/Xa以钙依赖的方式结合磷脂(即细胞表面);凝血酶原复合体组装的必要条件。第一个EGF同源结构域包含一个Ca2+结合位点，它作为一个铰链将EGF和GLA结构域相互折叠。分子的这个区域参与细胞结合域的识别。人因子X是通过结合常规技术和免疫亲和层析从新鲜冷冻的人血浆中分离出来的。除了标准的人因子X制备外，也可以使用无玻璃域的人因子X。牛因子X是从新鲜牛血浆中分离出来的，使用的是对Bajaj等人报道的方法的改进。小鼠因子X也从新鲜小鼠血浆中分离得到。纯化后的酵素以50% (vol/vol)甘油/H2O的溶液供应，应在-20℃下保存。纯度通过SDS-PAGE分析确定，活性通过因子X凝血测定测定。

 

艾美捷人因子Ⅹ HCX-0050相关参数：

Localization: 等离子

血浆浓度：10µg/ml

作用方式：Zymogen；丝氨酸蛋白酶因子Xa的前体

分子量：58900（人）（7）

55100（牛）（8）

59000（鼠）-根据人类价值推断

消光系数：E1 cm，280 nm=11.6（人体）（9）

=12.4（牛）（10）

=11.2（鼠）（13）

等电点：4.9-5.2（人）（9），4.8-5.2（牛）（9

结构：两个亚基，Mr=16200和42000（人类），Mr=116500

和39300（牛），NH2末端gla结构域，和两个

EGF结构域

碳水化合物百分比：15%（人）（7）、10%（牛）（8）、10%）（鼠）（13）

翻译后修饰：11个gla残基（7,8）

一种β-羟基天冬氨酸

 

人因子Ⅹ HCX-0050文献参考：

1. Davie, E.W., et al., Adv. Enzymol., 48, 277 (1979).

2. Jackson, C.M., Ann. Rev. Biochem., 49, 765 (1980).

3. Bajaj, S.P., et al., Prep. Biochem., 11, 397 (1981).

4. Church, W.R., et al., Thrombosis Res., 38, 417 (1985).

5. Bajaj, S.P., et al., J. Biol. Chem., 248, 7729 (1973).

6. Krishnaswamy, S., et al., J. Biol. Chem., 261, 8997 (1986).

7. Fujikawa, K., et al., Biochemistry, 11, 4882 (1972).

8. Discipio, R.G., et al., Biochemistry, 16, 698 (1977).

9. Discipio, R.G., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979).

10. Jackson, C.M., et al., Biochemistry, 7, 4506 (1968).

11. McMullen, B.A., et al., Biochemistry, 22, 2875 (1983).

12. Stenflo, J., Crit. Rev. Eukaryot. Gene Expr., 9, 59-88 (1999).