酶固定化-定义和方法简介
什么是酶固定化
固定化是指限制酶或蛋白质的移动性并将其固定到状态而不干扰其功能能力。 固定化酶固定在惰性的、载体不仅允许底物交换和产物流出，而且限制由于 pH 值或温度的变化而引起的酶构象的变化。因此酶固定化可以降低天然酶对这些的敏感性物理参数，从而提高酶的功能效率。
酶固定化的需要：
增加稳定性：由于酶在最稳定的功能中固定在惰性载体上形成它们对 pH 值和温度变化的抵抗力可以最小化，因为感知这些变化被锁定在酶的固定化中。
经济性质：将酶固定到惰性载体上可以重复利用酶用于下一批反应。 固定化酶可以很容易地从反应中去除混合物因此降低了酶的成本。
更容易向下流：由于催化剂固定在载体上，因此向下流变得更容易，因为它只需要分离反应物和最终产物。
固定酶的方法
有五种不同的方法酶或整个细胞的固定化。
(1) 吸附：吸附是最古老和最简单的酶固定方法。在这种方法中，酶是吸附在支撑物的外表面。载体和酶之间没有永久的键形成。只有弱键才能稳定酶到载体或载体上。
(2) 共价键合：该方法涉及在化学基团之间形成共价键酶和支持物或载体上的化学基团。 它是应用广泛的一种酶固定化方法。 支持物的羟基和氨基或酶更容易形成共价键。 载体或载体中的化学基团可以与支持物形成共价键的是氨基、亚氨基、羟基、羧基基团、硫醇基、甲基硫醇基、胍基和酚环。
(3) 诱捕：在这种方法中，酶被物理捕获在多孔基质内。 参与稳定酶与基质的键可以是共价的或非共价的。 使用的基质是水溶性聚合物。 基质的形式和性质因不同的酶而异。 这种方法最大的缺点是有一个：低分子量酶从基质中泄漏的可能性。
(4) 共聚：在这种固定化方法中，酶通过多功能试剂通过不同酶基团之间的共价键直接连接。 与其他方法不同，该方法不涉及基质或支持物。常用的多功能试剂是戊二醛和重氮盐。该技术便宜且简单，但不常用于纯酶。
(5) 封装：这种类型的固定是通过将酶封装在膜囊中完成的。 胶囊将由硝基纤维素或尼龙等半透膜制成。 在这种方法中，有效性取决于胶囊内酶的稳定性。
