负载铜离子壳聚糖水凝胶微球/胰岛素样生长因子-1的C结构域多肽修饰壳聚糖水凝胶的研究

今天瑞禧生物小编给大家整理分享了负载铜离子壳聚糖水凝胶微球/胰岛素样生长因子-1的C结构域多肽修饰壳聚糖水凝胶的研究制备，一起来学习！

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的C结构域多肽修饰壳聚糖(CS)制备生物活性 CS-IGF-1C水凝胶,评价水凝胶的细胞相容性及其对脂肪来源干细胞(ADSCs)生物学特性的影响.利用水凝胶负载ADSCs,评价CS-IGF-1C能否改善ADSCs在体内存活并提高其多向分化能力,探讨其增强细胞效果的机制,为使用组织工程学手段促进肾脏修复提供新的理论依据.

制备方法:1.从表达绿色荧光蛋白(GFP)-萤火虫荧光素酶(Fluc)双融合蛋白的转基因小鼠脂肪分离ADSCs进行体外培养,评价细胞增殖能力,使用荧光显微镜,流式细胞学(FCM)及生物发光成像(BLI)证实细胞转基因特性,鉴定细胞表型并描述其多向分化潜能.2.合成IGF-1的C结构域(IGF-1C)多肽,并使用多肽修饰CS获得CS-IGF-1C,使用傅里叶红外光谱(FT-IR)分析CS-IGF-1C的化学结构,平行板流变仪检测水凝胶的流变学特性,扫描电镜(SEM)观察CS-IGF-1材料的形态,并评价CS-IGF-1C的成胶性能.在涂布水凝胶的培养皿中培养ADSCs,观察细胞形态并使用活死染色评价水凝胶的细胞相容性.3.将ADSCs培养于涂布水凝胶的培养皿中,使用CCK-8法和BLI评价细胞增殖能力,实时定量RT-PCR技术检测细胞中增殖相关基因(HGF,IGF-1和EGF)的表达.

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