石蜡切片的HE染色

石蜡切片的HE染色

1,脱蜡前
a,应将组织切片在60摄氏度恒温箱中烘烤20分钟
b二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟
c,再将组织切片于无水乙醇,95%乙醇,75%乙醇等各级酒精中洗掉二甲苯
d,逐渐增加水分,每次浸泡5分钟,然后放入蒸馏水中
注意:脱蜡要彻底,时间宁长勿短
2,苏木素染核
时间大概5分钟,自来水洗,足够时间的水洗可使苏木素的颜色表现为蓝色并固定下来
3,观察效果
a,细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色
b,软骨基质,钙盐颗粒呈深蓝色
c,粘液成灰蓝色
注意:若染色过深可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝
d,再用胞浆染料伊红染胞浆,伊红的染色时间通过组织与伊红的亲和力不同进行调整
染色结束用自来水洗
注意:苏木素和伊红染色之间不需要盐酸酒精分化吗 需要
结果
细胞浆,红细胞,肌肉,结缔组织,嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比
4,脱水
用从低到高浓度的酒精进行脱水,
但因低浓度酒精对伊红有分化作用,将切片于60摄氏度恒温烤箱烘烤15分钟脱水效果更好
二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯再浸泡10分钟
封固时所用的封固剂浓度应适宜,树胶不宜过多以免溢出,也不宜过少,以致切片暴露在空气中而褪色或干燥,也不宜过稀,以免溢出玻片周围