杂交瘤细胞筛选---艾柏森生物
细胞融合
在获得两个亲本细胞以后需要对其融合，以获得B淋巴细胞-骨髓瘤细胞杂合体。细胞融合是指在自然或者人工条件下使得两个或两个以上细胞合并为一个细胞的过程。虽然细胞在体外培养条件下可能会自发融合，但是概率极低，因此需要借助外界诱导方法促进细胞融合。
诱导细胞融合的方法有生物法，化学法和物理法。
生物法：如紫外灭火的仙台病毒诱导细胞融合，其可以大大提高融合概率，在病毒类融合剂中最为有效，适用广泛。
化学法：目前应用广泛的有聚乙二醇。其易得，简便，融合效果也稳定。
物理法：电融合
杂交瘤细胞筛选
1）杂交瘤细胞选择
细胞融合会产生三种融合细胞：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合体，骨髓瘤与骨髓瘤细胞融合体，第三种就是需要筛选出来的B淋巴细胞与骨髓瘤的杂合体。
采用HAT培养基培养杂交瘤细胞，在该培养基中只有骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的杂合体才能存活并无限增殖。为此，在接种96孔板培养时，加入一定量的HAT培养液，经过1-2周的培养，杂交瘤细胞被选择培养出来。
2）特异性抗体筛选
初步筛选出来的杂交瘤细胞并不一定都能分泌特异性抗体，因此还需要进一步对这些杂合体进行筛选。目前实验室常用的是酶联免疫法，也就是将抗原固相在微孔板上，细胞培养上清一定时间后，用酶标记的抗鼠二抗，通过酶促底物的颜色变化了解是否存在针对该抗原的特异性抗体。该方法简便易行且可大规模操作，所以目前实验室都广泛采用此方法。
杂交瘤细胞克隆建株
在细胞融合初期，杂交瘤细胞的染色体常有丢失的现象，甚至导致其丧失分泌特异性抗体的功能。因此，在筛选抗体阳性的杂交瘤细胞时，应尽早进行克隆化，以保持杂交瘤细胞具有同源的子代。常见的方法有很多，比如有限稀释法（limiting dilution method）、软琼脂法（soft agar method）、单细胞显微操作法（single cell micromanipulation method）和荧光激活细胞分类仪（fluorescence activated cell sorter）。
杂交瘤细胞一经建立应尽快冻存，保证杂交瘤细胞不会被污染或变异。因此，必须在得到分泌特异性抗体的杂交瘤细胞后的早期，保存几批细胞于液氮中，以便在发生意外时可以将其复苏，继续进行实验。
