开发安全有效的双链 RNA(dsRNA) 传递系统仍然是基因沉默的主要挑战，尤其是在鳞翅目昆虫中。本研究评估了硫酸鱼精蛋白 (PS)/脂质/dsRNA 纳米颗粒 (NP) 递送系统对全球主要害虫草地贪夜蛾 (FAW) 细胞和幼虫中 RNA 干扰(RNAi) 的影响（图 1）。

使用与 dsRNA 复合的阳离子生物聚合物 PS 和阳离子脂质 Cellfectin (CF) 制备高效基因递送制剂。NPs通过两步自组装法制备。通过动态光散射和透射电子显微镜揭示了 NPs 的形成。CF/dsRNA/PS NPs 的形状和大小呈球形，范围从 20 到 100 nm，带正电荷 (+23.3 mV)。有趣的是，制备的 CF/dsRNA/PS NPs 可以保护 dsRNA (95%) 免受核酸酶降解，从而显著提高 dsRNA 的稳定性。与 PS/EGFP 和 CF/EGFP NP 相比，通过将 EGFP DNA 与 CF/PS 组合制备的制剂提高了 Sf9 细胞的转染效率。此外，PS/CF/dsRNA NPs 增强了 dsRNA 细胞内递送的内体逃逸。在与 CF/dsRNA/PS、PS/dsRNA、CF/dsRNA 或裸 dsRNA 孵育72 小时后，在 Sf9 荧光素酶 (Luc) 稳定细胞中评估基因敲低效率。在 CF/dsRNA/PS (76%) 和 PS/dsRNA (42.4%) 中检测到 Luc 基因的敲低，而在 Sf9 Luc 细胞中未检测到 CF/dsRNA (19.5%) 和裸 dsRNA (10.3%)。此外，CF/dsIAP/PS（25 μg dsRNA 靶向凋亡抑制剂、IAP、FAW 基因）NP 显示 FAW 幼虫中 IAP 基因的敲低（39.5%）和死亡率（55%）。这些结果展示了 PS/脂质/dsRNANPs 在 RNA 介导的害虫控制中的潜在应用价值。

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https://doi.org/10.1021/acs.jafc.2c00901