D-荧光素钾盐

D-荧光素钾盐 D-Luciferin potassium salt(D-萤光素钾盐;115144-35-9)是萤光素酶的底物，可催化生物发光昆虫产生典型的黄绿光。D-荧光素钾盐 在约 530 nm 的峰值波长处发出黄绿色发光。萤光素的盐形式溶解在水或其他典型的缓冲液中。

溶解度：易溶于水（30 mg/mL）

性状 Solid power，浅黄色粉末

储藏条件：Store at 4°C,-4℃下存储更优

D-荧光素钾盐 发光原理：

D-荧光素（D-Luciferin）为荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。原理是在荧光素酶和ATP的作用下，D-Luciferin能够被氧化发光。若存在过量的荧光素时，产生的光量子数和荧光素酶的浓度成正相关。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物（如小鼠）体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态，或药物的治疗效果等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光的强度变化，指示能量或生命体征。

备注：在细胞体内水环境下，D-荧光素（D-Luciferin）均是以离子形式存在，对于D-荧光素钠盐和钾盐，原理都是一样的。

D-荧光素钾盐 使用方法：

一、体外生物发光检测

1. 用无菌纯净水 对 D-荧光素钾盐 进行溶解，配制 30mg/mL的 D-荧光素钾盐 储备溶液 (100-200×) 摇均匀后即可使用，不能立即使用的 储备液可进行分装后，在-20℃避光条件下保存，避免反复冻融，对时机活性造成影响；

2. 在37℃恒温条件下预热处理组织培养基10-20分钟，再将处理后的培养基倒入储存液中，稀释至0.15-0.3 mg/mL（根据实验调节浓度）的工作液浓度；

3. 之后再去除混液中的细胞培养基；

4. 等待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，恒温37℃条件下孵育5-10 min，之后再进行图像分析。

二、活体成像分析

1. 采用无菌的 DPBS缓冲液 (w/o Mg2+、Ca2+) 配制成为：15 mg/mL的荧光素的储存液，混匀。

2. 使用水系0.2 µm真是滤器过滤对储备液进行除菌处理，处理后可即使使用，或者在-20℃避光条件下保存，避免反复冻融，对时机活性造成影响；

3. 腹腔注射（i.p.）：按照 150 mg/kg 的荧光素/体重浓度比例进行注射；

4. 注射入体内10-15 min后（等待光信号达到最强稳定平台期）之后，再进行成像分析；

D-荧光素K+和Na+盐通常用作萤火虫荧光素酶底物，用于体外和体内生物发光检测。D-荧光素的质量和纯度对于获得良好和可重复的结果至关重要。