GoldView,区分单双链DNA染料
Goldview 是BIOFOUNT 推出的一款可以替代溴化乙锭(EB)的新的核酸染料产品,在采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 过程中,Goldview 与 DNA可以发生结合后会产生比较强的荧光,其荧光灵敏度与 EB 差不多,Goldview 的使用方法与EB 基本相同。在紫外透射光条件下,双链DNA 会呈现出绿色荧光,而单链DNA 会呈现出红色荧光。Goldview非常适合大片段(>1 kb)的 DNA检测,其具有灵敏度高的特点。当然也可用于 RNA染色。
Goldview 使用方法
1. 将100ml 琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)在微波炉中融化。
2. 加入 5-10 μl 的Goldview(若背景过高可以适当减少用量;若灵敏度过低,可以适当增加用量),轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕,使用凝胶成像系统或可见光透射仪观测。
备注:若使用凝胶成像系统照相时,通过调节光圈、曝光时间选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
Goldview 注意事项
1. 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2. 加入 Goldview 的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响。
3. Goldview 特别适用于大片段(>1 kb)DNA的检测。对于更小片段的DNA,特别是<500bp检测信号可能很弱或者无信号。对于<500bp的DNA染色,建议使用SYBR Green I 核酸染料。
4. 含 Goldview 的凝胶不适合进行胶回收实验。
5. Goldview 的主要成分是吖啶橙,具有细胞渗透性,有一定的细胞毒性。建议操作人员使用时做好防护措施,带上手套和口罩。并妥善处理好废弃物。
6. 公司可提供无毒的 EB替代物, gelred:
案例:
GoldView staining of the samples . Samples with the fluorescence change from orange to green under UV lamp at a 254 nm are considered as positive (Lanes 2 and 3), while a sample with fluorescence change from orange to red is considered as negative (Lane 1).