甄选服务② | 吉满腺相关病毒(adeno-associated virus)包装

背景介绍

腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)，是目前发现的一类结构最简单的单链DNA缺陷型病毒，通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。

重组腺相关病毒(recombinant AAV,rAAV)，是利用AAV2型基因组与不同血清型的医壳蛋白基因组结合产生的混合病毒载体。通常我们所说的AAV其实就是rAAV。

吉满生物利用AAV Helper-Free System，由包装质粒(编码目的基因以及两个ITR序列组成)、辅助质粒(Cap和Rep基因)以及腺病毒Helper质粒三种质粒转染到293细胞所获得的重组腺相关病毒可以满足客户的不同实验需求。

腺相关病毒基因递送和表达特点

01

特异性好

AAV血清型种类繁多，不同血清型在感染时具有不同的组织器官偏好性，实现感染特异性，是动物实验首选

02

扩散性强

AAV体积小、滴度高，因此具有远高于腺病毒和慢病毒的扩散性，能够大面积感染组织

03

安全性高

目前已经有多项基于AAV载体的治疗药物被应用于临床，表现出很高的安全性

04

免疫原性低

重组AAV不带有病毒功能及结构蛋白，用于基因治疗基本不引起免疫反应

AAV-血清型

AAV血清型，即抗血清类型，不同的AAV血清型具有不同的衣壳蛋白空间结构。不同衣壳蛋白空间结构识别与结合的细胞表面受体不同，这也导致不同血清型AAV感染效率、组织亲嗜性、表达时间不同。

根据衣壳蛋白的蛋白结构和所结合的细胞外受体分子不同，可以分为数十种血清型。不同血清型的AAV组织感染嗜亲性各不相同，表现出一定的器官靶向特异性，如下：

AAV-启动子

启动子决定了下游基因的表达强度和模式，是位于结构基因5’端上游的DNA序列，负责RNA聚合酶识别、结合、转录的DNA序列，常见的有CMV,EF1α,CAG,U6,Ubi 等。

启动子根据其作用方式和功能分类如图所示，这种分类大体上反映了它们各自的特点，但不是绝对的。在某些情况下，一种类型的启动子往往兼有其它类型启动子的特性。

组织特异性启动子

又称为器官特异性启动子。在这类启动子的作用下，基因的表达往往只限于某些特定的组织或器官，同时表现出发育调节等特性。从而克服了组成型启动子启动的外源基因在受体植物中非特异、持续、高效表达所造成的浪费，增加转基因的效果，因此人们对特异性启动子的研究和应用越来越重视。

特异性启动子来源，大部分的组织特异性启动子是从特定细胞专一表达的基因启动子鉴定得来的。但不是所有的细胞特异性表达的基因的启动子都可以作为AAV载体的细胞特异性启动子。

更多组织特异性启动子持续开发中！

吉满案例展示

案例一

使用吉满生物提供的腺相关病毒(AAV-shIRF4，Genomeditech)抑制IRF4的表达后，缓解了狼疮小鼠的疾病进程

(Signal Transduct Target Ther(IF:13.493;Q1).2023 May 22;8(1):188.）

案例二

使用腺相关病毒AAV介导的小鼠PKCε的肝脏过表达

(Cell Metab (IF:21.567;Q1).2023 Jan 3;35(1):101-117.e11.）

案例三

通过尾静脉注射Tie-Nrf2 shRNA,Tie-PGC-1α shRNA(AAV9,5x1011 viral particles, Genomeditech)和对照腺相关病毒，与糖尿病ApoE−/−小鼠相比，Rb1处理后的小鼠主动脉动脉粥样硬化病变大受抑制，Nrf2或PGC-1α缺失后，Rb1并不能减弱动脉粥样硬化斑块的形成(Cell Death Dis (IF:6.304;Q1). 2022 Sep 26;13(9):824.）

案例四

使用吉满生物提供AAV9病毒经尾静脉注射2周后观察心脏荧光图；

(Mol Ther Nucleic Acids. 2020 Aug 29;22:251-262.）

吉满生物可为客户提供定制过表达AAV、shRNA AAV、Cas9-sgRNA AAV，此外更有大量现货AAV产品可供选择，涵盖光遗传、化学遗传、钙指示剂、神经递质探针等工具。

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吉满生物科技（上海）有限公司成立于2011年，是专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。以病毒包装为基础，密切关注行业最前沿的科研进展，十二年深耕细作，创建了具有自主知识产权的分子生物学、细胞生物学、慢病毒、腺相关病毒、报告基因、抗体表达六大技术平台。

2020年成立了专业细胞系子品牌DDXCELL，提供报告基因检测、病毒包装、工程细胞株构建，基因编辑及药物筛选评价等技术服务及相关产品。

2022年载体品牌“载体通·Genovector”焕新升级，同时推出全新试剂品牌“优试剂·Genoagent”，贯穿科研始末。

吉满可为客户提供几千种的现货载体和一站式定制服务。