威廉姆斯血液学Williams Hematology笔记-§1.3骨髓检查
参考书籍：
1.威廉姆斯血液学/（美）Kenneth Kaushansky主编；陈竺，陈赛娟主译.北京：人民卫生出版社，2018
2.英汉汉英血液学词汇手册/吴德沛，包海燕，乔渝森主编. -北京：人民卫生出版社，2020
第一篇 临床评估
第三章 骨髓检查
缩写：
CD：cluster of differentiation分化群
FISH：fluorescence in situ hybridization荧光原位杂交
MRD：minimal residual disease微小残留病
英文专业词汇：
Immunophenotyping 免疫表型分型
Forward light scatter 前向光散射
Side light scatter 侧向光散射
Blood film 血片
Blood smear血涂片
Bone marrow aspiration 骨髓穿刺
Bone marrow biopsy 骨髓活检
Bone trabecula 骨小梁
Concentrate blood film 浓缩血片
Feathered edges of the blood film 血片羽毛边缘
Hyperplasia 增生
hypoplasia增生低下
Promyelocyte 早幼粒细胞
Puncture 穿刺
Reticulocyte 网织红细胞
Ringed sideroblast 环状铁粒幼细胞
Sectioning 切片
Touch imprint 印片
Vacuole 空泡
一、各项检测技术
1.骨髓穿刺vs骨髓活检
骨髓穿刺时抽取骨髓液涂片检查
骨髓活检是取骨髓组织处理后切片检查，用于对骨髓增生状况进行定量以及对骨髓浸润性疾病进行诊断
2.骨髓细胞形态学时诊断恶性血液疾病的金标准，并构成对非恶性疾病的鉴别诊断。
3.免疫组织化学：以单一细胞为基础的表型，效用仅限于抗原决定簇。
4.流式细胞仪：检测细胞蛋白质、细胞蛋白的量的改变，以及在同一细胞同时测定多种蛋白。
5.基因表达芯片：分析RNA表达各级，以发现基于基因表达的诊断格局
6.分子探测：针对DNA序列（FISH、PCR、全基因组测序）
二、骨髓穿刺术
1.优选穿刺部位：髂后上棘、髂前上棘
2.不良反应：出血、感染、对麻醉剂反应。骨质下结构损伤。
三、骨髓穿刺活检术
Jamshidi针具：中空的圆柱状针具，远端同心型锥体，末端锐利、呈斜角的针尖。
四、标本制备：骨髓穿刺前需要对诊断问题认真推敲，以便获得足够量样本进行所有必要的特殊检查，从而获得正确诊断。
1.骨髓涂片：未经处理的骨髓穿刺悬液滴到载玻片上立即涂片，适用于骨髓细胞形态学检查和骨髓分类计数
2.颗粒涂片：适用于检查骨髓细胞增生程度、巨核细胞数量
3.浓缩涂片：抗凝骨髓离心后得到浓缩有核细胞进行制备（骨髓增生低下时检测数量较少的细胞）
4.活检印片
5.组织学切片：石蜡包埋
五、骨髓制片的形态学检查
1.骨髓标本是否合适：骨髓穿刺液中含有骨髓颗粒时针具进入髓腔病成功抽取到骨髓的最好证明。
2.骨髓增生程度：
1）定义：骨髓腔内造血细胞所占空间相对于脂肪及非造血组织所占空间百分比
2）正常比例：儿童80%，30岁50%。以同年龄正常人作为对照评估患者骨髓增生程度。
3）骨髓颗粒是增生程度的最佳指示，由骨髓穿刺制备的骨髓颗粒检查结果与骨髓活检所得结果之间有比较好的一致性。
4）结果分析：
（1）红系细胞：低倍观察，簇状排列
（2）巨核系：低倍观察，散在分布
（3）粒红比例：2:1-4:1（不能用浓缩涂片）
5）骨髓浸润性疾病：
（1）恶性肿瘤：
①非造血系统肿瘤转移在骨髓活检中的特征是骨髓结构的破坏，伴有细胞形态学异常的细胞群。
②肿瘤细胞紧密黏附成簇有助于识别肿瘤特征
③异常淋巴细胞聚集：
a、细胞学非典型性
b、细胞群体形态单一性
c、常见于骨小梁附近
d、免疫组化、FISH鉴别浆细胞骨髓瘤和淋巴组织增生性疾病
（2）纤维化：骨髓活检标本中识别
①特征：骨髓网网状纤维染色增加
②可伴随原发造血疾患或浸润性（肿瘤转移）
（3）储存型疾病：Gaucher病、NieMann-Pick病——可见不同类型储存物质的异常巨噬细胞
（4）淀粉样变：形成β折叠片的二级结构的改变而产生的不溶于水的细胞外蛋白，刚果红染色阳性
6）感染：
（1）单核细胞内：利什曼原虫、组织胞浆菌、弓形虫
①播散性利什曼病：骨髓镜检和培养是最敏感的诊断方法
②分枝杆菌：骨髓培养检测
③播散性组织胞浆菌病：骨髓形态学是敏感方法
（2）骨髓肉芽肿：骨髓活检发现
7）坏死和胶原样变
（1）骨髓坏死：镰刀细胞贫血病、累及骨髓的恶性疾病
（2）骨髓胶原样变：存在无形的胞外物质，脂肪萎缩，骨髓增生低下
六、造血系列的形态学区分
骨髓分类计数需要检查300-500个有核细胞
1.髓系（粒系）
2.单核系：在评估MDS和急性白血病时被等同于原始细胞
3.巨噬细胞
噬血细胞性巨噬细胞：自免溶贫的特征
4.红系
5.储存铁评估：普鲁士蓝进行染色
1）选择的细胞：骨髓巨噬细胞
2）病理性环状铁粒幼细胞：铁颗粒数量增多，排成环状，围绕至少1/3细胞核
6.巨核系
7.淋巴系
8.浆系
9.肥大细胞
10.破骨细胞、成骨细胞
七、流式细胞仪
1.概述
1）使用了针对分化抗原簇（CD）的荧光标记单克隆抗体这一主要诊断工具。
2）免疫表型分析数据（细胞膜表面，胞质内、细胞核抗原表达）时血液系统恶性疾病诊断和分型的关键决定指标。
2.基本原理：详见视频
四色到六色分析、侧向和前向光散射分析。
3.MRD的评估：预后标志物
4.疾病鉴别诊断（有些细胞具有阶段特异性）
1）骨髓中未成熟细胞群体：CD34、CD117
2）未成熟的T细胞前体：CD34、CD8
3）APL：HLA-DR表达缺失
4）浆细胞骨髓瘤：高水平CD56、CD117
5）T细胞淋巴瘤：丢失了CD7、CD26
6）CLL：细胞膜免疫球蛋白、CD20表达弱
7）MDS：CD34+细胞比例增加，CD34+B祖细胞减少。
本文仅供学习交流使用，不能作为诊断、治疗的依据，请谨慎参阅
