自身免疫性神经炎动物模型(动物实验代做)
【模型机制】将制备的家兔坐骨神经匀浆抗原加弗氏完全佐剂(CFA),注于大鼠足垫下,进行基础免疫和加强免疫,致使坐骨神经呈现大量炎症细胞浸润和脱髓鞘改变,神经纤维和神经外膜中均可见炎症细胞浸润灶。
【造模方法】
1.动物和制备抗原 选用雄性SD大鼠,体重170~190g。主要仪器:OLYMPUS荧光多功能显微镜(BX60,日本OLYMPUS公司)。制备抗原:取健康家兔坐骨神经2g,剪碎,用超声匀浆机制成匀浆,调整浓度为150g/L,置于一30℃冰箱备用。
2.EAN模型诱导 取大鼠,每只足垫下注射神经匀浆与等量弗氏完全佐剂共0.5ml。基础免疫后7天,用同样方法及剂量加强免疫1次,连续观察30天。
3.大鼠坐骨神经病理学检查 4组动物观察30天后处死,速取其右侧坐骨神经,放人10%甲醛溶液中固定。常规石蜡包埋切片,片厚6μm。再经常规HE染色后,镜检并摄片。
【模型特点】
1.呈现大量炎症细胞浸润和脱髓鞘改变 神经纤维和神经外膜中均可见炎症细胞浸润灶,主要是淋巴细胞和巨噬细胞。
2.神经纤维中见片状分布的神经纤维脱髓鞘病变 髓鞘呈节段性的肿胀、空泡化。有的部位可见裸露的轴索存在。
【注意事项】
1.基础免疫后7天,必须用同样方法及剂量再加强免疫1次。
2.模型成功的标准是神经病理组织学检查,重点检查神经纤维和外膜中炎症细胞浸润和脱髓鞘改变。
【应用范围】适用于EAN的发病机制,临床表现、神经病理学改变及电生理等研究。探讨针刺、皮质类激素对 EAN的治疗作用,TNF、IL-4及Th1、Th2、Th3 细胞因子在 EAN发病中的作用。
【模型评估】该模型造模方法简单易行,神经病理学改变典型,建立的病理模型与人类吉兰-巴雷综合征(Guillain Barre syndrome,GES)的病理特征相类似,是世界公认的用于研究GBS的典型动物模型。
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