自身炎症性免疫动物模型【疾病动物模型】
自身炎症性免疫动物模型【疾病动物模型】
自身免疫病是临床免疫病的重要组成部分。自身免疫动物模型(animal model of auto-immune diseases)对澄清自身免疫反应的发病机制有重要意义。
【造模机制】CJ-S131菌体抗原辅以佐剂免疫小鼠,由于细菌持续释放CJ-S131菌体抗原,反复刺激机体的免疫系统,可诱导产生抗ds-DNA和 Ss-DNA自身抗体,亦能使T、B细胞的反应性增强,在肝、肾、肠等组织产生炎症性病理损伤。
【造模方法】选用纯品系小鼠。仪器药品:酶标仪、分光光度计、CJ-S131菌、弗氏完全佐剂等。
模型制作:
1.CJ-S31抗原制备 用含0.3%的甲醛生理盐水,洗下琼脂板上培养24小时的CJ-S31菌苔,用生理盐水稀释,400r/min,离心30分钟,弃上清液,加生理盐水混成悬液,在分光光度计540nm波长下,将细菌悬液调OD值为1.25。
2.免疫小鼠 取细菌悬液与等量弗氏完全佐剂混匀,完全乳化后,取50μ1给小鼠注射,免疫后第15天,取OD值1.25的细菌悬液0.2ml,给小鼠静脉注射,加强免疫一次。小鼠致敏后4周,测血清抗体,抗体生成细胞(PFC)和淋巴细胞转化,同时取肝、肾、肠等组织做病理学检查。
3.模型检测 用 ELISA方法测定小鼠血清中抗 ds-DNA和抗ss-DNA自身抗体。
【模型特点】免疫小鼠1个月,小鼠血清中抗 ds-DNA和 ss-DNA抗体水平明显升高;脾细胞的PFC值明显升高;在ConA刺激或无有丝分裂原作用的条件下,淋巴细胞的转化率明显升高。在肝脏有散在的炎性细胞浸润灶,浸润细胞以中性粒细胞和淋巴细胞为主,库普弗细胞明显增生。在肾脏,肾小球系膜细胞明显增生,肾小管上皮细胞有浊肿样变性。在肠道可见大量的炎性细胞浸润,肠上皮细胞有明显的增生。
【注意事项】细菌悬液与等量弗氏完全佐剂混匀,应完全乳化后再免疫。否则免疫效果不好。
【应用范围】该模型对澄清自身免疫反应的发病机制有重要意义。
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