O-聚糖的分析策略
糖蛋白中的O-聚糖分析是糖组学研究中的重要内容。O糖基化修饰分析研究的主要内容通常包括鉴定发生O-糖基化修饰的氨基酸类型以及该氨基酸在肽链中所处的位置、O-聚糖的结构以及含量等。当前主要利用生物质谱技术结合专一性的糖苷内切酶的作用来实现,分析策略和流程大致包括:
(1)O-聚糖的酶解释放;
(2)液相色谱纯化富集O-聚糖肽;
(3)质谱检测以及数据解析。
O聚糖分析第一步就是利用酶解消化将糖链从糖蛋白上释放下来,被切下来的聚糖含有酶切缓冲体系中的盐或蛋白质等其他杂质,会严重干扰其后续检测,因此有必要对其进行脱盐和纯化处理,利用亲水色谱去除杂质的同时还能富集O-聚糖,提高了O-聚糖的丰度,有利于后续的质谱检测。将色谱的分离分析与质谱的结构鉴定联合起来可以实现聚糖更精细的分析和鉴定。
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