基因工程题型专题（一）【选必三】|考点精华
喵喵 | 3-5 基因工程题型专题（一）
1️⃣限制酶基础题型
习题1
下图是3种限制酶对DNA分子的识别序列和酶切位点示意图。
限制酶1 一↓ GATC一 限制酶2一CCG ↓ CGG— 限制酶3 —G ↓ GATCC一下列相关叙述错误的是
A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性
B. 根据识别序列的长度推测，在人类基因组中限制酶1的位点最少【长度越少，切割位点越多】
C. 限制酶1和酶3剪切DNA形成的黏性末端相同
D. 限制酶2剪切DNA会形成平末端
习题2
限制酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamH l 、EcoR l 、HindⅢ及Bgl ll的识别序列及每一种限制酶的特定切割部位。
其中哪两种限制酶切割出来的DNA片段粘性末端可以互补结合
A. BamHⅠ和EcoR l
B. BamHⅠ和HindⅢ
C. BamH l和Bgl ll✓
D. EcoR I和HindⅢ
习题3
下列黏性末端，用DNA连接酶能连接在一起的是
A. ①和④
B. ②和③
C. ①和③
D. ②和④✓
【提问】
- 不同酶是否可以切出相同黏性末端?
可以
2. 想把目的基因从DNA切下来，切几刀？切开质粒至少需要切几刀？
目的基因至少切2刀，质粒至少切1刀（最好2刀用双酶切）
3. 线性DNA被同种酶切割形成5个片段，则该DNA上有几个该酶的酶切位点？
切4刀
习题4
基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是：—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示，判断下列操作正确的是
A. 目的基因用限制酶Ⅰ切割，质粒用限制酶Ⅱ切割
B. 目的基因用限制酶Ⅱ切割，质粒用限制酶Ⅰ切割✓
C. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
习题5
某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列叙述正确的是
A. a酶与b酶切断的化学键并不相同【都是磷酸二酯键】
B. 不同的限制酶a与b识别的序列不同，因此切出的末端不同【相同，都是GATC】
C. 在该DNA分子上a酶与b酶的切割位点分别有3个和2个【画图】
D. 基因工程中的限制酶主要是从酵母菌等真核生物中分离纯化得到【原核生物】
2️⃣限制酶选取题型
如何选限制酶?
①能把目的基因切下来，但不能切断目的基因
②与运载体有相同的黏性末端或平末端
③不能让目的基因和质粒自连
④插在启动子和终止子之间，且正向连接
习题6
下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有Bgl II，EcoRⅠ和Sau3A l。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是
A. 用EcoR l切割目的基因和质粒载体
B. 用Bgl Ⅱ和EcoR l切割目的基因和质粒载体
C. 用Bgl Ⅱ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
D. 用EcoR I和Sau3A Ⅰ切割目的基因和质粒载体✓【尽可能靠近】
习题7
表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1，图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是
A. 一个图1所示的质粒分子经Sma l切割前后，分别含有0，1个游离的磷酸基团【线性的有2个磷酸基团】
B. 同时使用限制酶Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ切割图中的质粒和外源DNA，可防止其自身环化✓
C. 构建cDNA文库时，需要利用逆转录酶，不需要使用限制酶【cDNA是mRNA逆转录形成，还需要用限制酶】
D. 因为限制酶具有特异性，所以不同的限制酶酶切DNA后一定形成不同的黏性末端【还有同尾酶】
3️⃣启动子题型
如何选启动子？
①若把人基因导入大肠杆菌，选择的启动子为，大肠杆菌启动子还是人的启动子?
- 大肠杆菌
②若想让目的基因只在特定组织中表达：强启动子还是组织特异性启动子?
- 组织特定性启动子
习题8
植物学家在培育抗虫棉时，对目的基因作了适当的修饰，使得目的基因在棉花植株的整个生长发育期都能表达，以防止害虫侵害，这种对目的基因所作的修饰发生在
A. 终止子
B. 标记基因
C. 结构基因
D. 启动子✓【能启动表达就是先启动转录】
习题9
环境雌激素（EEs）影响动物和人类的性腺发育，斑马鱼在EEs的诱导下会表达出卵黄蛋白原（vtg）。已知绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，下列操作合理的是
A. 将EEs基因的启动子与GFP基因重组
B. 将vtg基因的启动子与GFP基因重组✓
C. 将GFP基因的启动子与GFP基因重组
D. 将GFP基因的启动子与vtg基因重组
4️⃣DNA的粗提取及鉴定实验
- 实验原理
（1）DNA的粗提取原理：
①DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，初步分离DNA与蛋白质。
②DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。
（2）DNA的鉴定原理:在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
2. 材料选择
富含DNA的材料，如新鲜洋葱（也可选择香蕉、菠菜、菜花和猪肝等）。
【提问】
是否可选择猪血红细胞提取DNA？
是否可选择鸡血红细胞提取DNA?
【提问】
- 研磨液中添加洗涤剂和NaCl的作用？
- 洗涤剂：是瓦解细胞膜和核膜
- 食盐：溶解DNA
2. 析出DNA时必须用“冷酒精”。预冷的酒精具有优点?
（1）抑制核酸水解酶的活性，防止DNA降解；
（2）降低分子运动，易于形成沉淀析出;
（3）低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断。
【鉴定DNA】
习题10
下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是
A. 羊的成熟红细胞可作为提取DNA的材料【哺乳动物成熟红细胞，没有细胞核】
B. 提取植物细胞的DNA时，需要加入一定量的洗涤剂和食盐
C. 预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解
D. 在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色
习题11
下表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述，不正确的是
A. A
B. B
C. C【冷酒精是溶解蛋白质的】
D. D
习题12
如图是”DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列叙述正确的是
A. 图1中溶液a 是 NaCl 溶液✓
B. 图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶【蛋白质溶于酒精，DNA不溶】
C. 图2试管1的作用是证明2 mol ·L⁻¹NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色【NaCl跟二苯胺不出现颜色】
D. 图2所示实验操作中有一处错误，可能导致试管②中蓝色变化不明显✓【DNA溶液需要加入NaCl】
