艾美捷双链RNA定量试剂盒组分及原理分析

双链RNA (dsRNA) 抗体及ELISA试剂盒常被应用于mRNA产品的质控环节。dsRNA抗体包括J2单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb J2)，J5单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb J5)，K1单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb K1)和K2单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb K2)，其中J2抗体是dsRNA检测的金标准。J2抗dsRNA IgG2a单克隆抗体已成为dsRNA检测的J标准。

艾美捷双链RNA定量试剂盒使用的两种dsRNA抗体如下：

雌性DBA/2小鼠腹腔注射50ug L-dsRNA

和75ug甲基化牛血清白蛋白的混合物，在完全弗氏佐剂中乳化。

在几次增强后，将脾细胞与Sp2/0-Agl4骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤克隆J2和K2。

艾美捷双链RNA定量试剂盒包含以下试剂，用于200次测试（2x96孔）：

试剂01：1小瓶包衣抗体（储存于-20℃

试剂A：1小瓶142 bp dsRNA作为阳性对照（储存于-20℃）

试剂B：1小瓶dsRNA特异性检测抗体（在RPMI+5%FBS中，储存在+4℃或最好是-20℃）

试剂C：1小瓶HRP缀合的F（ab’）2山羊抗小鼠二级抗体片段（储存于+4℃或-20℃）

试剂D：1小瓶TMB底物溶液（储存于+4℃，避光

艾美捷双链RNA定量试剂盒原理：

基于使用两种双链 RNA (dsRNA) 特异性单克隆抗体，dsRNA 检测试剂盒可以灵敏和选择性地检测 dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸组成和序列的影响。检测具有高度特异性：在存在 1.000-10.000 倍过量其他核酸的情况下，可以检测核酸提取物中的dsRNA。该测定基于双抗夹心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠单克隆抗体作为捕获抗体，单克隆抗体 K2 (IgM) 用作检测抗体。

艾美捷双链RNA定量试剂盒原理：

基于使用两种双链 RNA (dsRNA) 特异性单克隆抗体，dsRNA 检测试剂盒可以灵敏和选择性地检测 dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸组成和序列的影响。检测具有高度特异性：在存在 1.000-10.000 倍过量其他核酸的情况下，可以检测核酸提取物中的dsRNA。该测定基于双抗夹心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠单克隆抗体作为捕获抗体，单克隆抗体 K2 (IgM) 用作检测抗体。