【李林生物基础1000】第11章 生物技术与工程 （3） 基因工程

61天高考 进阶简易版

浙科.限制性内切核酸酶

人教.限制性核酸内切酶 外切酶.DNA水解酶

DNA连接酶

1）大肠杆菌的限制酶EcoR I

质粒（较小环状DNA分子）

1）复制起点 独立自主复制+稳定存在

2）启动子：与RNA聚合酶结合

终止子：终止转录的过程

目的基因的起/终点 帮助目的基因的表达

表达载体.使目的基因扩增及表达出蛋白质

包含转录和翻译的信号

克隆载体.大量扩增外源DNA 无启动/终止子 （克隆即复制）

3）标记基因

抗性基因 eg.amp氨苄青霉素抗性基因和

tet四环素抗性基因(r标没写)

【质粒上有启动/终止子.复制起点.标记基因.多个限制酶识别序列】

刷题

1.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 ，一个（限制性内切核酸酶的）识别位点 要一个目的基因就足够了 每个目的基因至少要表达一个...分子

这是成功表达....酶的必要前提

2.PCR不用解旋酶，只用Taq耐高温DNA聚合酶

结合textbook了▪将目的基因导入受体细胞

制备感受态细胞再转入外源DNA

（低温，低浓度）CaCl2溶液→造成细胞膨胀，细胞膜通透性改变→短暂热刺激

评论区答疑

Q：dna探针是老教材的吗，和dna分子杂交有什么不一样吗——　吹雪君

A：DNA探针是最常用的核酸探针，核酸分子杂交利用核酸探针，检测特异的核苷酸序列。核酸探针是带有放射性或荧光标记的具有特定核苷酸序列的DNA或RNA。

同理，DNA分子杂交也是常用的核酸分子杂交之一，核酸分子杂交可以检测受体细胞是否还有目的基因转录出的mRNA。

以及额外的PCR检测（电泳／DNA测序检测PCR产物）和抗原抗体杂交技术（蛋白质）检测

四者都是检测目的基因是否表达成功的方法。

持续更新，争做李林老师的课代表doge．

制作不易，支持一下

我也做了第10章 生态学 （4）生态学综合的笔记，不过优先更基因工程