IHC免疫组化技术应用

2022-08-26 13:51 作者:Cas9X海星生物 0人读过 | 我要投稿

免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)是临床病理诊断中常用的技术和手段。从20世纪70年代开始，免疫组化技术就已经应用于病理诊断，对诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。

1. 什么是免疫组化？
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原。然后通过免疫动物后获得特异性的抗体，再用此抗体去探测组织或细胞中的同类抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法（荧光素、酶、金属离子、同位素）将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究（Figure 1）。

Figure 1. The theoretical diagram of IHC

免疫组化针对的样本主要是组织。组织是来自患者或动物，经过冷冻或石蜡包埋。将这些组织制成约4μm厚的切片，封片后再处理。若样本是细胞，通常被称为免疫细胞化学（Immunocytochemistry，ICC）。对于ICC，大部分细胞外基质及其他基质组分被去除，只剩下整个细胞来染色。ICC的来源可以是细胞悬液，来自患者或动物（如血涂片、拭子等），或在实验室中进行的组织培养细胞系。

2. 免疫组化技术在临床上的应用
免疫组化因为其特异性高，敏感性强，方法步骤统一、形态、功能和代谢结合密切等方面的优势，使得其成为临床病理不可或缺的手段。目前免疫组化技术应用于临床主要有以下几个方面：

（1）肿瘤良恶性的判断：对于反应性增生还是肿瘤性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。

（2）确定肿瘤分期：肿瘤分期是判断预后的一个指标，与是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭密切相关，而通过免疫组化方法可以判断肿瘤是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭。

（3）细胞属性的判定：通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分，来判定细胞的属性，确定肿瘤的来源。

（4）确定来源不明的转移瘤的原发部位：对于来源不明的转移瘤，用免疫组化技术有助于确定恶性肿瘤的组织学来源，进一步确定原发部位。如角蛋白抗体(CK20)在胃肠道癌、胆管癌、胰腺癌中阳性，而在肺癌、乳腺癌、肾癌中阴性。

（5）对“未分化”恶性肿瘤的分类：未分化恶性肿瘤包括癌或肉瘤，在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞的起源特征不能分类，初步区分组织学类型用非特异性抗体，在其基础上再选用特异性抗体做进一步鉴定。

（6）进一步分类不同器官与组织交界处肿瘤：由于重叠的特征，在一些组织器官交界处的肿瘤，仅凭组织学基础对肿瘤进行分类很困难。如发生于组织交界处的肿瘤有睾丸胚胎癌与精原细胞癌，两者较难区别，且治疗与预后显著不同，但用免疫组化检测角蛋白就较易于区别，角蛋白阴性则为精原细胞癌，而角蛋白阳性则为胚胎癌。

（7）及时准确的发现微小转移灶：在常规组织切片中，辨别单个或几个转移性肿瘤细胞很难，淋巴结内窦性组织细胞增生与某些癌的早期转移有时也不易区别，而采用免疫组化方法，有助于及时准确的发现微小(癌)转移灶。

3. IHC标准品细胞株定制服务
免疫组织化学的过程质控尤为重要。目前的IHC参考品较多来源于人体组织样本，数量有限，无法长期稳定的用于参考品生产。而来源于肿瘤，存在组织异质性，不能很好的确保参考品的均匀性和一致性。海星生物针对现有产品的缺陷，通过高效基因编辑技术和表达系统，可以获得肿瘤标志物IHC染色、弱染色、中等染色及强染色的单克隆细胞系，作为IHC的参考品。