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能定量能定性!IP实验解析--一文让你彻底明白免疫沉淀!(抗体-蛋白)

2023-08-17 21:20 作者:科研根号三  | 我要投稿

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IP 是利用抗体特异性反应富集纯化目的蛋白的一种方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。


1、IP 研究基础

2、IP原理

① IP 结合原理

IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G”特异性的结合到抗体(免疫球蛋白)的Fc片段的现象开发出来的方法。


② IP 分离原理

3、IP 实验流程

4、IP 实验实施

5、IP 定性结果

①蛋白质谱检测

②蛋白WB检测

③考马斯亮蓝检测

④电镜晶体结构分析


6、IP 定量结果

①WB检测蛋白表达量

②考马斯亮蓝检测


7、IP 拓展

①Co-IP

证明两个蛋白在胞内有相互作用,但是这个作用可以是直接相互作用,也可以是形成复合物后的间接相互作用。

②ChIP

即染色质免疫沉淀,是一项研究蛋白质与DNA相互结合的实验技术。

③RIP

又称为RNA-IP,即RNA免疫共沉淀,是研究蛋白质与RNA互作结合的经典技术方法。


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