钛修饰外泌体/负载外泌体金属基体/聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶包封外泌体的制备

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具体涉及一种钛修饰双亲性高分子材料及其制备方法和其在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途。本发明钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)是由Ti(III)的DTPA络合物和DSPE-PEG2000-NH,经偶联反应制备而成的,本发明材料的双亲性特点可以将外泌体牢固连接在钛植体表面,为其发挥促进种植体成骨分化作用提供了必要的支撑。实验证实,经此高分子材料修饰的外泌体对骨髓干细胞成骨分化具有显著的促进作用,作为一种新的且行之有效的外泌体修饰方案,本发明材料具备广阔的制剂研发和临床应用前景。

钛修饰双亲性外泌体的制备方法,包括以下步骤:

(1)Ti(III)的DTPA络合物的制备:先将0.01摩尔DTPA溶于10mL NaOH溶液中,NaOH溶液的浓度为3.16×105mol/L,pH为9.5,然后向所得溶液中迅速加入1mL含有0.015摩尔TiCl,的盐酸溶液,盐酸溶液的体积百分比浓度为15%,待溶液变蓝后,用碳酸钠调节pH至6,即获得Ti(III)的DTPA络合物溶液;

(2)EDC活化:向上述Ti(III)的DTPA络合物溶液中加入50mg的EDC,静置2小时后,采用pH为7.5的HEPES缓冲液透析8-12小时得到透析内液,其中活化产物的分子量为100ODa;

(⑶)偶联反应:向上步所得透析内液中加入0.01摩尔DSPE-PEG2000-NH,,静置8-12小时后得到产物溶液;

(4) 产物处理:上述产物溶液经分子量为4000Da的超滤离心柱离心除去未连接分子,滤液冻干后即得到目标产物本发明钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)。

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