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从专业角度认识 重组人干细胞因子rHuSCF,一种造血生长因子

2023-02-13 14:53 作者:youngshe-Leslie  | 我要投稿

重组人干细胞因子是一种造血生长因子,通过c-Kit受体发出信号来发挥其活性。SCF和c-Kit对于黑素细胞和生殖细胞谱系的造血细胞的生存、增殖和分化至关重要。人SCF在小鼠细胞上表现出低活性,而小鼠和大鼠SCF在人细胞上完全活性。人SCF基因编码273个氨基酸的跨膜蛋白,其中包含25个氨基酸的N端信号序列、189个氨基酸的胞外结构域、23个氨基酸的膜外结构域和36个氨基酸的细胞质结构域。分泌可溶性SCF是通过膜锚定前体的蛋白水解加工产生的。重组人SCF是含有165个氨基酸残基的18.4kDa多肽,其对应于分泌可溶性SCF形式的序列。

AA Sequence:

MEGICRNRVT NNVKDVTKLV ANLPKDYMIT  LKYVPGMDVL PSHCWISEMV VQLSDSLTDL LDKFSNISEG LSNYSIIDKL VNIVDDLVEC  VKENSSKDLK KSFKSPEPRL FTPEEFFRIF NRSIDAFKDF VVASETSDCV VSSTLSPEKD  SRVSVTKPFM LPPVA

在大肠杆菌中产生的干细胞因子人类重组蛋白是一条含有165个氨基酸的非糖基化单链,分子量为18409道尔顿。

氨基酸序列

测定了前五个N端氨基酸的序列,发现其为Met-Glu-Gly-Ile-Cys。

生物活性

通过对人TF-1细胞的剂量依赖性刺激测定的ED50小于2 ng/ml,对应于500000 IU/mg的比活性。

蛋白质含量

通过两种独立的方法进行蛋白质定量

1.在280nm的紫外光谱,使用0.52的吸收值作为0.1%(1mg/ml)溶液的消光系数。该值由蛋白质序列的PC基因计算机分析程序(IntelliGenetics)计算。

2.使用干细胞因子的标准溶液作为参考标准,通过RP-HPLC进行分析。


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