着床动物模型【疾病动物模型代做】
着床动物模型【疾病动物模型代做】
(一)在体模型
【造模机制】哺乳动物胚胎着床过程中,胚胎与子宫之间通过复杂的双向识别与相互协调,使胚胎在较短的子宫内膜接受期内与子宫内膜贴附,随后滋养细胞侵人内膜与母体底蜕膜共同形成胎盘。
【造模方法】实验大队和小鼠。常规手术器械一套。麻醉用药(如戊巴比安钠)。雌二醇、黄体酮、植物油等。1、假孕模型在研究胚胎着床和黄体退化的研究中,除正常妊娠模蠻外,发情大鼠或小鼠与结扎输精管的雄鼠交配后,虽然没有胚胎形成,但交配刺敞却能诱导卵巢和子宫发生某些类似妊娠的变化。2.延迟着床模型在交配第 4 天向假孕小鼠子宫注人一点植物油,油滴就会模仿胚胎诱导子宫内膜发生蜕膜反应;如果在雄鼠与可育雄鼠交配后切除卵巢,再每天给雌鼠皮下注射黄体酮,胚胎无法植人子宫壁而是游离在子宫腔中,处于一种休眠状态,如果此时给雌鼠注射小剂量雌激素,胚泡就会迅速在子宫中着床。
【模型特点】此类模型所经历的过程与正常妊娠大体一致。
【应用范围】适用于对胚泡着床相关因子的基础和功能研究。
【注意事项】雌二醇和黄体酮的保存要分开,雖二醇的浓度是黄体酮的二百万分之一,因配制或注射等操作原因,黄体酮很容易污染雌二醇。
【模型评价】体内模型发生在子宫腔内,不便观察胚胎与母体子宫内膜之间的相互作用。
(二)体外模型
【造模机制】胚胎着床涉及胚胎与母体,将围着床胚胎及分离纯化的滋养细胞,在体外条件下与母体成分如子宫内膜、子宫内膜上皮细胞,基质、蜕膜细胞,细胞外基质,羊膜等共培养。
【造模方法】实验小鼠。常规手术器械一套。显微镜、二氧化碳培养箱。麻醉用药(如戊***钠)。F12:DMEM(1:1)培养液、胎牛血清、雌二醇、黄体酮等。
1.小鼠胚泡与单层子宫内膜细胞的共培养,该模型中的囊胚仅仅定位黏附在上皮细胞层上并不能侵入上皮细胞中,利用该模型仅能进行胚胎着床第一阶段的研究。
2.胚泡与子宫上皮细胞和基质细胞共培养子宫上皮细胞与基质细胞通过一个人工的基底膜分开,胚泡被种植在上皮细胞层上。光镜及电镜观察到囊胚黏附并侵入到上皮细胞层中,但是未穿透基底膜到达基质细胞层。
3.小鼠囊胚与子宫内膜的共培养该模型观察到囊胚的贴附与植人是连续的,没有单层模型中所见的滋养细胞的外延生长。
【模型特点】胚胎成分与母体成分在体外培养时能实现相互黏附以及滋养层细胞在培养板上的外延生长。
【应用范围】适用于对胚泡着床相关因子的基础研究。
【注意事项】体外培养条件与在体时不完全相同,不能完全再现在体时的形态、结构功能.
【模型评价】虽然胚胎成分与母体成分相黏附及滋养细胞外延生长,但很少有胚胎或滋养细胞能真正侵入母体成分。
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