DNA提取及基本步骤

什么是DNA提取

DNA提取是DNA的分离和纯化过程。 DNA 可以从血液、冷冻组织样本或石蜡组织块中分离出来。 DNA 提取的三个步骤是细胞裂解、DNA 分离和沉淀。 在细胞裂解过程中，细胞膜和细胞核膜等细胞膜屏障会破裂，从而暴露 DNA。 下一步是从样品中去除膜脂。 最后，DNA 的沉淀涉及通过蛋白酶去除 DNA 相关蛋白和通过 RNase 去除 RNA。

图 1：DNA 提取步骤

DNA 提取的基本步骤

1. 细胞裂解与细胞裂解缓冲液裂解细胞膜

2. 脂质被洗涤剂和表面活性剂分解

3. 通过添加蛋白酶消化蛋白质

4. 通过添加 RNase 消化 RNA

5. 通过加入浓盐然后离心分离细胞碎片、消化蛋白质、脂质和 RNA

6. 用冰冷的乙醇或异丙醇乙醇沉淀 DNA。 醋酸钠的离子强度可用于改善沉淀。 沉淀的 DNA 在最终溶液中呈线状。

图 2：提取的 DNA

酚-氯仿萃取也可用于从蛋白质中分离 DNA。 在这里，苯酚使样品中的蛋白质变性，DNA 在提取结束时保留在水相中。 而且，在有机相中，您可以找到变性的蛋白质。 另一种提取 DNA 的方法是微柱纯化。 在这里，DNA 与柱子的结合取决于缓冲液的 pH 值和盐浓度。