COX荧光抑制剂筛选试剂盒的功能与应用

环氧合酶（COX，又称前列腺素H合酶或PGHS）是一种具有COX和过氧化物酶活性的双功能酶。环氧合酶组分将花生四烯酸转化为氢过氧化物内过氧化物（PGG2），过氧化物酶组分将内过氧化物还原为相应的醇（PGH2），即PGs、血栓素和前列环素的前体。

现在已经确定COX有两种不同的亚型。COX-1在多种细胞类型中组成性表达，并参与正常细胞内稳态。多种刺激物，如佛波酯、脂多糖和细胞因子，导致第二种COX亚型COX的诱导表达.在急性炎症条件下，COX-2负责PGs的生物合成。这种诱导型COX-2被认为是非甾体抗炎药抗炎活性的靶酶。

艾美捷COX荧光抑制剂筛选试验为筛选绵羊COX-1和人类重组COX-2的同工酶特异性抑制剂提供了一种方便的基于荧光的方法。该分析利用了柯萨病毒的过氧化物酶成分。PGG2和ADHP（10-乙酰基-3,7-二羟基苯恶嗪）之间的反应产生高荧光化合物resorufin。

使用板块上的井没有特定的模式。然而，有需要将三个孔指定为非酶或背景孔。这些孔的荧光须从COX孔中测得的荧光中减去。建议对每个COX样品进行一式三份的分析。

艾美捷COX荧光抑制剂筛选试剂盒实验注意事项：

•所有孔中的分析最终体积为200µl。

•在分析中使用稀释的分析缓冲液。

•所有试剂（酶除外）须平衡至室温在开始化验之前。

•无需一次性使用板上的所有孔。

•不必同时使用这两种酶。可以使用COX-1或COX-2进行研究。

•建议化验样品一式三份，但用户可自行决定。

•可对30个抑制剂样品进行一式三份或四十六份的分析。

•在室温下进行分析。

•用530-540 nm的激发波长和585-595 nm的发射波长监测荧光。

•在靠近荧光计的位置启动花生四烯酸反应，因为有必要在反应开始两分钟后读取平板。