「青莲聚焦」蛋白质组学FAQ蛋白产品相关问题(二)
蛋白质组学(英语:proteomics,又译作蛋白质体学),是以蛋白质组为研究对象,研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学。这个概念最早是在1994年,由Marc Wikins首先提出的新名词。
上周二分享了蛋白产品相关问题(一),本周二将分享蛋白产品相关问题(二)~
现在小编将带您进入今日主题
6. iTRAQ/TMT蛋白组学分析的优点是什么?
答案:通过不同分子量的实际对不同来源样品进行标记的方式,实现不同样品间蛋白质组比较的目标,两种方法都一次性完成(iTRAQ 8个/TMT 16个)全部样品的定性定量分析,降低了实验误差,排除仪器造成的样本间差异,稳定性更高,操作简单,数据分析流程简单,适用于所有物种蛋白的定量分析。
7. TMT 对仪器有哪些要求,目前有哪些仪器可以做该实验?
答案:TMT试剂标签之间的质量差额在0.006Da左右,需要质谱二级分辨率在50K以上才能准确分辨出不同的报告离子,因此只有在高分辨质谱仪上才能完成标记定量实验。主流仪器有Thermo fisher QE系列质谱仪、fusion系列质谱仪、AB sciex QTOF系列质谱仪。
8. 我们公司的标记实验流程?
答案:蛋白质提取,出具蛋白质控报告,反馈客户,肽段酶解,多肽标记,HPLC分馏分,质谱数据采集,数据分析出具结题报告。
9. iTRAQ&TMT 标记实验时需注意哪些问题,对样品有什么要求
答案:iTRAQ&TMT适用于相同组织的相对定量分析,不能进行有或无的鉴定,不能将不同的组织部位一起标记上机,更不能将不用物种的样本一起上机;对蛋白总量需求较LFQ要高,100ug以上。
10. 不同组织类型的样本做 iTRAQ /TMT能否同组上机?
答案:同一批上机的样本必须是相同物种、相同组织类型才能一批上机和一起分析。搜库时是鉴定其共有蛋白,差异分析也是共有蛋白在定量值上的差异倍数FC。如果选择不同样本类型的样本,他们的特异性蛋白就会被过滤掉。
本周的FAQ就到此结束啦~
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我们下周不见不散~
