二抗
2023-08-11 17:05 作者:bili_11941002676 | 我要投稿
1、什么是二抗?
二抗是靶向结合免疫球蛋白(抗体)分子的抗体。在免疫检测(间接检测)中,在理想状态下,二抗特异性地与特定种属和类别(同型)的一抗结合。请注意,二抗不与目标蛋白的表位直接结合,也不具有抗原标位特异性(这其实是由一抗决定的)。带有标记的二抗决定了检测方法。
2、二抗是如何产生的?
二抗是在动物中生产并收集的,具体方法是用另一种动物的抗体来免疫动物。用于免疫的抗体的特性(如种属、亚类、片段等)决定了二抗的特异性。例如,兔抗大鼠lgG2b(H+L)二抗是用大鼠lgG2b免疫球蛋白分子的重链和轻链来免疫兔子而生产的。
3、二抗有哪些优势?
由于多个二抗可以与单个一抗结合(信号放大),二抗提高了检测的灵敏度。
1)直接检测:带有单个偶联物的抗体靶向结合感兴趣的目标
①灵敏度;缺乏二抗的信号方法,因此信号较弱
②灵活性:直标一抗种类有限,灵活性较低
③时间:一步标记,操作时间较短
2)间接检测:使用不带偶联物的一抗以及带有偶联物的二抗
①灵敏度:多个二抗与单个一抗结合,使得信号放大
②灵活性:与一抗结合的标记二抗种类繁多,灵活性较高
③时间:两步标记,操作时间长