新一代慢病毒载体生产专用转染试剂-FectoVIR®-LV转染试剂
慢病毒载体被认为是同种异体或自体细胞疗法(如CAR-T)的首选载体,因为它能够将病毒基因组永久整合到宿主细胞DNA中。为了生产这些载体,细胞治疗生产商通常使用瞬时转染系统,该系统在工艺开发阶段扩大规模。 FectoVIR-LV®是新一代转染试剂,不含动物成分,旨在提高悬浮HEK-293细胞系统中的LV产率。FectoVIR-LV®专为大规模生产设计,可减少转染复合物体积并提高复合物稳定性。FectoVIR-LV®的优势在于可以增加每批生产的剂量数量以治疗更多患者,同时降低LV的制造成本。 同时,Polyplus还可以提供新的实验设计(DoE)服务,以优化转染条件,提高在悬浮系统中LV载体的滴度和质量。 产品性能 ● 产率高:在悬浮系统中达到更高的慢病毒载体滴度
Fig 1. 与慢病毒生产领域的竞争者相比,FectoVIR®-LV表现出高产率。HEK-293T细胞悬浮培养在125 mL摇瓶中,使用FectoVIR®-LV或其他3种竞争产品和4质粒系统生产慢病毒载体。将转染复合物孵育15、30或45分钟,使用推荐条件(比例DNA:转染试剂为1:1,每百万个细胞1μg DNA,5%复合物体积),并在转染后72小时收获LV。 ● 成本效益:通过获得高滴度和减少DNA消耗降低每批成本
图2.FectoVIR®-LV转染方案使用更少量的DNA并优化滴度,以提高工艺经济性。HEK-293T细胞悬浮培养在125 mL摇瓶中,使用FectoVIR®-LV或PEIpro®和4质粒系统生产慢病毒载体。使用FectoVIR®-LV,转染复合物孵育30分钟,使用不同比例的DNA:转染试剂(从1.5到2),DNA数量(从0.5到1μg/ 10E6细胞)。PEIpro®使用推荐的转染方案。转染后72小时收获LV。 ● 可放大性:适合大规模生产,复合物体积小,稳定性高
● 节省时间:使用DOE服务帮助您快速的优化流程 更多文献解读,实验技巧学习,可在“优宁维分子生物学”公众号查询