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为何相比于细胞实验,腺相关病毒(AAV)更适用于动物实验呢?

2023-05-24 10:45 作者:小恒学术  | 我要投稿

       AAV载体在体外实验中用于感染培养细胞时,常发现其表达水平较低,而且有表达延迟现象。这是因为AAV基因组是单链的,它进入细胞以后,必须要有一个由单链变为双链的过程,然后其所携带的外源基因才能进行转录和翻译,在没有辅助病毒或其它辅助因子的情况下,这种AAV由单链DNA在细胞内复制形成双链DNA的过程是十分缓慢的,因此相对于其它双链DNA病毒载体如单纯疱疹病毒(HSV)和腺病毒(Ad),其表达明显延后。此外,AAV对细胞毒性低,培养的细胞在加入AAV后,细胞分裂生长能力不受太大的影响,这样也对AAV载体有一种稀释作用,也导致其表观表达水平较低。而在体内应用时,注射部位的组织细胞通常没有显著增殖,不会出现AAV载体被稀释的情况,而且在体内各种促进AAV载体所携带外源基因表达的各种因子相对丰富,故体内应用时,AAV载体的表达水平比较高。研究表明辅助病毒或其它辅助因子可以明显促进单链DNA复制成双链DNA,从而明显提高外源基因的表达水平,故在体外应用可以考虑加入辅助病毒(Ad5)或丁酸钠(终浓度10~50mmol/L),这样可以提高表达水平达5~10倍。

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