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蛋白胶切割色谱分析

2023-06-14 12:00 作者:百泰派克生物科技  | 我要投稿

电泳技术是一种常用的蛋白质分离分析技术,主要包括十二烷基硫酸钠-聚丙烯电泳(SDS-PAGE)、等电聚焦电泳(IEF)以及两者的结合体二维凝胶电泳(2-DE)等。不同的电泳技术根据蛋白质不同特征参数如分子质量、等电点将蛋白质分离开来,电泳结束后不同分子质量或等电点的蛋白质被分离为不同的蛋白条带。但是由于电泳技术的分辨率不够高,一些分子质量或等电点很相近的蛋白质可能不能被分离开来,而包含在同一个蛋白条带中。

色谱技术是目前较为先进的化合物分离纯化技术,其以化合物在流动相和固定相之间的相互作用为基础,当溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生的作用(吸附、排阻、离子吸引、亲和等)的大小和强弱不同,导致其通过固定相的速度和时间不同而先后从固定相中流出,从而实现各组分的分离纯化。将电泳后的蛋白质胶条再进行高分辨率的色谱分析,可以进一步分离同一个胶条中差异微小的蛋白质,也可对电泳技术的分离结果进行验证。


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