与Nature同款的5hmc羟化酶TET活性检测方案

很多研究表明，5hmC 表达水平与基因表达调控、多能干细胞分化、神经元发育、以及肿瘤发生都密切相关。

人TET蛋白家族包含TET1、TET2和TET3这3个成员，所有TET蛋白都包含一个保守的双链β-螺旋结构域、一个富含半胱氨酸区和C端的核心催化结构域。而研究表明，基因组5hmC 水平与 TET 羟化酶活性相关。

那么如何检测5hmc羟化酶TET的活性呢？不妨来看下Nature同款方案：

以5mC-羟化酶TET活性/抑制分析试剂盒【5mC-Hydroxylase TET Activity/Inhibition Assay Kit】为例分析说明，该试剂盒有比色法（#P-3086）和荧光法（#P-3087）两种。

实验原理：甲基化底物被稳定地包埋在微孔板上。活性 TETs (客户提供)与底物结合，并将甲基化底物转化为羟甲基化产物。Tet- 转化的羟甲基化产物可以被特异性抗体识别。羟甲基化产物的比例或数量与酶的活性成正比，然后可以通过读取波长为450nm的吸光度或者荧光强度来对比分析。TET 酶的活性与测得的光强度成正比。

适用样本：TET酶的细胞核提取物；纯化的TET酶（TETs, 1-3）

性能展示：

好了，就介绍到这里啦，有兴趣的小伙伴们评论区留言哈

文章来源：Nature同款，5羟甲基胞嘧啶(5hmC)羟化酶 TET活性分析

https://www.amyjet.com/featured/5hmc.shtml