外泌体偶联转铁蛋白超顺磁纳米粒子/功能化串晶结构纳米纤维膜/载外泌体纳米纱复合支架

今天瑞禧生物小编给大家整理分享的是外泌体偶联转铁蛋白超顺磁纳米粒子/功能化串晶结构纳米纤维膜/负载外泌体纳米纱复合支架的研究制备，来看！

为提高合成可吸收引导骨再生膜的骨诱导活性,通过静电纺丝和溶剂诱导结晶法制备了聚己内酯(PCL)/β-磷酸三钙(β-TCP)串晶纳米纤维膜﹐并通过聚多巴胺的黏附作用将外泌体负载于纤维膜上进行改性，对复合纤维膜的微观形貌﹑化学组成、理化性能和细胞成骨分化性能进行测试与分析。结果表明:PCL/B-TCP纳米纤维上成功诱导出串晶结构,且经串晶和聚多巴胺双重修饰的纤维膜具有最佳的表面浸润性和优异的蛋白吸附能力,最终获得的外泌体功能化的串晶纳米纤维膜在串晶结构、聚多巴胺和外泌体共同作用下可促进骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性的增加,有望应用于体内加速骨愈合。

外泌体功能化串晶结构纳米纤维膜的制备方法：

首先,将PCL颗粒加入至CF和 DMF(二者体积比为3∶1)中配制成质量浓度为0.12 g/mL的PCL溶液;向PCL溶液中加入B-TCP(占PCL质量的5%),超声波处理1 h使β-TCP充分分散;在磁力搅拌下形成均匀混合的纺丝液。将上述纺丝液转移至装有19G针头的10 mL注射器中在静电纺丝机上进行纺丝。纺丝电压为15 kV，推注速度为1.2 mL/h,纺丝距离为15 cm。将所得静电纺丝纤维膜置于37℃真空干燥箱中干燥24 h以充分去除残留有机溶剂,将该纤维膜记为PT5。

然后﹐采用溶剂诱导结晶法在纳米纤维表面制备串晶结构。将PCL颗粒溶于乙酸戊酯中配制0.01 glmL的PCL稀溶液﹐在60 ℃温度下磁力搅拌2 h,冷却至室温后滴加于PT5纤维膜上过夜使溶剂自然挥发，得到具有串晶结构的纤维膜，记为PT5SK。

最后,将制备的PT5和PT5SK静电纺纤维膜分别浸入2 mg/mL的盐酸多巴胺和 10 mmol/L Tris-HCl(pH 值为8.5)中,并在37℃和60 r/min摇床中孵育12 h;之后将纤维膜用去离子水超声波清洗多次至水不变色,然后于37℃真空干燥24 h,所得样品分别记为PT5/PDA 和 PT5SK/PDA。

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