链霉素毒性反应与氯化钙的对抗作用

一、实验目的  通过实验，学习测定药物LD50的方法、步骤和计算方法，了解急性毒性试验的常规方法。 二、实验原理  半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量的对数值表示。LD50及相应置信区间是由剂量-反应模型得出的最常用的统计量。新药急性毒性试验的LD50测定是临床前安全评价的重要内容，也是各类药品(化学、中药和生物制品)注册时必需申报的资料。LD50的测定方法很多，如：目测机率单位法、机率单位加权回归法（Bliss法）、寇氏法（Karber法）及序贯法等，其中Bliss法是目前推荐使用的方法。我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评定必须采用的方法。  三、实验材料  1.1.器材：电子天平 2.2.试剂：硫酸镁溶液。 3.3.动物：小白鼠。 四、实验步骤   1、预试验 取小鼠8只，以2只为一组分成4组，选择组距较大的一系列剂量，分别按组腹腔注硫酸镁溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%死亡率和100％死亡率剂量的所在范围（至少应找出引起20%～80%死亡率）。（参考剂量：LD100为1.2g/kg, LD 0为 0.7g/kg）。  2、正式试验  在预初验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用6个剂量（1.2 g/kg 、1.1g/kg 、1g/kg 、0.9g/kg 、0.8g/kg、0.7g/kg），每组8只小鼠，动物的体重和性别要均匀分配，完成动物分组和剂量计算后按腹腔注射给药。 3、LD50测定中应观察纪录的项目 ⑴ 实验要素：药物的批号，动物品系，来源，性别，体重，给药方式及剂量、给药时间等。 ⑵ 给药后各种反应：潜伏期，中毒现象，开始出现死亡的时间，死前的现象，各组死亡的只数等。  4、结果计算 实验完毕后，清点各组死亡鼠数和算出死亡率（P），使用SPSS软件进行机率单位加权回归法(Bliss法)计算LD50。