关于细胞计数仪你应该了解的一切

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       血球计数板是一种常用的细胞计数工具，医学上通常用来计数红细胞、白细胞等而得名，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。

一、血球计数板的基本结构

       血球计数板由优质厚玻璃制成，有4个凹槽口，中间部分被“H”型凹槽分为上下两个相同的计数平台。有9个主要方格构成，角上的方格被进一步分为16个小方格， 中央的方格又称为计数室，被分为25个小小的方格，每个小小方格又被分为16个微型方格。因为计数室的长宽各是1mm，所以计数室的体积为：1mm*1mm*0.1mm=0.1mm3=10-4mL。而血球计数板又分为汤麦式和希利格式。

汤麦式：大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格即 25 × 16 型。

希利格式：大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格即16 × 25 型。

       但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点：即每一大方格都是由400个小方格组成。

二、细胞计数板的原理

       将已稀释好的细胞放入血球计数板的计数室内，使用显微镜对其进行计数，再使用计算公式对其计算即可得出测试细胞的浓度。

三、血球计数板的使用方法

       在细胞计数中，为了较快而准确的计数，一般选择“S”型计数路径进行计数。

       如果一个方格内细胞数过多，难以数清，应当再对样液进行适当稀释，一般以每个小方格内分布 4 ～ 5 个细胞为宜。如果统计的每个中方格内的细胞数目相互之间相差 20 个以上，表示细胞分布不均，必须对样液摇匀后重新计数。最后再利用计算公式对其计数结果进行计算则可得出细胞的浓度。

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四、血球计数板的缺点

       传统血球计数板显微镜计数，人为计数主观性强，从样品混匀-稀释-加样到计数区域、换算公式的选择，焦距调节，计数读数等，即便按照规范的步骤进行也会因为操作者的理解和习惯的差异产生极大的随机误差，计数结果可靠性大打折扣，重复性差。而利用细胞计数仪来对细胞进行计数则可减少大量的误差与计数时间时间。据实验表明，人工计数的时间通常在15分钟左右；误差为10%甚至更高。当多位科学家对同一样品进行计数时，差异甚至超过20%。而牛顿光学CytoEasy单样品（五视野）测量时间为10秒，误差低于5%。

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