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Fluorescein Phalloidin,荧光素-鬼笔环肽

2022-11-18 10:48 作者:biofount科研试剂  | 我要投稿

荧光素-鬼笔环肽(Fluorescein Phalloidin,Fluorescently-labeled phalloidin)复合物是一种偶联绿色荧光染料荧光素 (FITC) 的高亲和力 F-actin 肌动蛋白探针。最大激发/发射波长(Ex/Em):495~496/513~516nm。:

图1:荧光素-鬼笔环肽结构式

荧光素-鬼笔环肽的应用

  • 可用于可视化和定量组织切片

  • 细胞培养物或无细胞制备物中的 F-actin 肌动蛋白

  • 荧光素鬼笔环肽复合物完全兼容细胞分析过程使用的其他荧光染色剂,包括荧光蛋白、Qdot™ 纳米晶体和 Alexa Fluor™ 偶联物(包括二抗)。

荧光素-鬼笔环肽(Fluorescein Phalloidin)使用方法:
一、制备  Fluorescein Phalloidin 工作溶液:
在含有 1% BSA 的 1 mL PBS 中加入 1 μL 的 1000× 荧光素鬼笔环肽 DMSO 溶液。
注意:
1. 不同的细胞类型可能会有不同的染色。荧光素鬼笔环肽工作溶液的浓度应相应配制。
2. 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 用于减少非特异性背景染色。
二、染色细胞:
1. 用 PBS 清洗细胞 2-3 次。在室温下将细胞固定在 PBS 中的 3.7% 无甲醇甲醛溶液中 10-30 分钟。
注意:避免使用任何含有甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2. 用 PBS 清洗固定的细胞 2-3 次。
3. 可选:将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定细胞中 3-5 分钟以增加渗透性。在 PBS 中清洗细胞 2-3 次。
4. 将荧光素鬼笔环肽工作液100 μL/孔(96孔板)加入固定的细胞中,室温染色20~90分钟。
5. 用 PBS 轻轻冲洗细胞 2-3 次,以去除多余的荧光素鬼笔环肽。
6. 在所需的 Ex/Em 波长下运行荧光显微镜或其他设备(荧光素鬼笔环肽,Ex/Em=497/516 nm)。

图2:荧光素-鬼笔环肽荧光光谱

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