【菜鸟博士】waters UPLC HPLC使用教程之十三、校正曲线
【菜鸟博士】waters UPLC HPLC使用教程之十三、校正曲线
十三、校正曲线
处理校正标准样时，软件会为处理方法的“组分”表中列出的每个组分生成校正曲线。因此，在对未知样进行定量前需要进行外标校正曲线的绘制。
1、新建外标校正曲线
外标校正曲线的建立步骤为：
1、在如下图1所示的项目界面，在通道内选择需要处理的标准样数据（一般是最低浓度或含量标样），双击后进入到“查看-主窗口”界面，如图2所示。
图 1
2、在“查看-主窗口”界面按照“9、处理方法”的步骤新建处理方法，保存处理方法名称（例如Sam_ESTD），如图3所示。
图 2
图 3
3、在如下图4所示的项目界面，在通道内选择需要绘制标准曲线的数据，点击右键选择“改变样品”，弹出“修改样品”窗口。注：在Empower进行处理时，只有标样能够生成校正曲线，然后才能对未知样进行定量计算。如果在进样时没有正确设置样品类型，可在此窗口直接进行修改（如图5中红框内）。也可针对具体情况，修改样品名称、样品重量以及稀释倍数。
图 4
图 5
4、在如下图6所示的“修改样品”窗口点击菜单栏中的“编辑”并选择“含量”进入到“组分编辑器”界面，如图7所示。注：“组分编辑器”界面选择“全部样品”表单。
图 6
5、在 “组分编辑器”窗口点击菜单栏中的“编辑”并选择“从处理方法复制组分”即弹出“打开现有的处理方法”界面，如图8所示。选择已有的处理方法并打开则在组分编辑器中显示处理方法中的组分，如图9所示。
图 7
图 8
6、在 “组分编辑器”界面中，在“全部样品”表单中，针对对照品的每一组分，填写“数值”，必要时填写“单位”后，确定后关闭组分编辑器。注：在填写“值（标准样）”列下标准样组份的含量时，将“组份编辑器”界面与“修改样品”界面相比较，在“值（标准样）”下光标所在列的含量即为“修改样品”界面中显黑的标准样品的含量。
图 9
6、在下图10中的“修改样品”界面中点击菜单栏中的“文件”并点击保存后退出“修改样品”窗口。
图 10
2、定量计算
经过上一节对标准样进行处理后即可进行对未知样的定量等。对未知样的定量的步骤为：
1、在如下图11所示的项目通道界面依次选中要处理的全部样品（注意先选择标样，再选择未知样），右键鼠标在弹出的菜单中选择“处理”，即弹出“后台处理和报告”窗口如图12所示。
图 11
2、在“后台处理和报告”窗口勾选“处理”及 “使用指定的处理方法”并选择已建立的处理方法（如Sam_ESTD），可勾选“清除校正”。点击确定后即对已选择数据进行校正并定量。
图 12
3、在如下图13所示的项目结果界面可查看经过校正定量过的未知样结果及处理过的标准样。双击未知样结果即打开其“查看-主窗口”，如图14所示。在结果表中可以查看未知样的定量结果。
图 13
图 14
4、从“查看-主窗口”进入到“校准曲线窗口”可查看由标准样经处理后所绘制的标准曲线的相关信息，如线性方程及相关系数等，如图15所示。
图 15
5、在“校准曲线窗口”中也可改变组份来查看不同峰或组份的后所绘制的标准曲线的相关信息，如图16所示。
图 16
发布于 2022-05-12 16:30
