细胞因子相关问题，千万别忽视！

细胞因子（cytokine，CK）是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质，具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织修复等多种功能。

细胞因子具有以下作用特点：

多向性和靶向性：一种细胞因子可由多种细胞产生，作用于不同的靶细胞。例如，IL-5既可以来源于Th2细胞，也可以来源于肥大细胞，既能活化B细胞增殖，又能促进嗜酸性粒细胞分化、成熟，

即时性：基本不储存，随时产生并发挥作用。

局部性：通常以自分泌或者旁分泌的形式作用于周围细胞。

相互协调：以网络形式发挥作用，不同细胞因子间相互抑制或促进。

多重调节：发挥的效应与细胞因子浓度、靶细胞类型、其他细胞因子种类以及种属有关。

 

常见细胞因子的作用：

 

由于天然的细胞因子表达量低，分泌具有短时自限性，难以收集提纯，一般通过蛋白重组技术获得，即先用基因克隆或化学合成技术获得目的基因，连接到适合的表达载体，导入到特定的宿主细胞，利用宿主细胞的遗传系统，表达出有功能的蛋白质分子。目前常用的有原核、真核、昆虫、哺乳动物四种表达系统。

1）细胞因子作为动物免疫抗原进行检测类抗体的研究，蛋白纯度需大于80%；若用于晶体及晶体结构研究，蛋白纯度需大于95%；

2）若需选择不同种属来源的细胞因子，则要判断两种种属的细胞是否有交叉反应活性。一般来说，不同种属之间蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可确定为有交叉活性；
3）根据实验目的选择想要的产品时，我们还需要关注一下内毒素的水平，特别是作为细胞添加物使用时。

 

许多老师在收到冻干粉之后由于保存或者溶解不当造成实验结果不理想，小爱也遇到过很多老师询问，产品室温保存了两个月还能用吗？溶解不了怎么回事？细胞因子储存和溶解其实都很简单，爱必信的细胞因子说明书中给了明确标注。

 

1、收到的冻干粉如何处理？

我们收到的冻干蛋白一般不会立即使用，这种情况下可放置-20℃储存，室温一般储存三周左右，具体时间可参照说明书，请老师们妥善保存收到的产品。

 

2、冻干蛋白一般如何溶解？

敲黑板！！！溶解前，一定要将冻干粉离心收集于离心管底部，不同的冻干蛋白需要的溶解剂不同，比如，abs04698重组人IL4使用中蒸馏水即可溶解， abs04177 IGF-I蛋白需溶解在500mM乙酸中，这是由PH和离子浓度能多种因素决定的，大家一定要仔细阅读说明书，此外，一定要溶解到说明书推荐的浓度范围，否则可能会造成不完全溶解或活性减弱。

 

3、溶解方式

用枪头轻轻捶打即可，对于相对较难溶解的，可以在低速摇床上静止两小时左右，切不可剧烈震荡。

 

4、溶解后的蛋白如何储存呢？

重组蛋白溶液一般可在4-7°C下储存2-7天。避免反复冻融可将溶液分装于聚丙烯管中（不会吸附蛋白），在<-20°C下稳定保存3个月左右，适当加入载体蛋白（BSA、HAS、FBS等）可减少管壁对重组蛋白的吸附损耗。