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2-NBDG,葡萄糖摄取荧光探针

2022-10-17 16:01 作者:BIOFOUNT范德生物  | 我要投稿

2-NBDG,葡萄糖摄取荧光探针(2-NBD-Glucose)是荧光标记的脱氧葡萄糖类似物,用于直接监测活细胞和组织对葡萄糖的摄取。 2-NBD用作检测瘤形成的局部造影剂。 摄取可以通过实时共聚焦、高分辨率或宽视场荧光显微镜和流式细胞术进行监测。

溶解度Solubility:溶于乙醇至 50 mM,溶于 DMSO 至 25 mM

性状:solid,固体粉末

储藏条件:4℃ (1-2weeks), longer storage period at -20℃ (1-2years)

1. 2-NBDG储存液制备方法?

向 1mg粉末中加 100μl 无水DMSO 或者 乙醇,进行充分溶解混匀,制备成10mg/ml的储存液,按照单次用量进行分装后,在-20C避光条件下冷藏存储。若已经配制成水溶液后,建议存周期不超过一天。
如实验需要延长保存周期,最好是以粉末的形式在-20C条件下保存。先用乙醇溶解固体粉末,然后分装成小量装入独立瓶内,使用真空泵将溶剂抽干即可。此时不推荐用DMSO或DMF为溶剂,因挥发性比较差。

2. 2-NBDG工作浓度?

2-NBDG 的常用工作浓度大约10-600μM。细菌或者酵母菌染色的建议浓度范为100-600μM,原代和传代培养哺乳动物细胞建议工作浓度范围为10-200μM。
日常实验过程 2-NBDG 工作浓度范围为: 30-300μM。
细胞需要在在合适的温度条件下孵育,以充分检测绿-黄色荧光。摄取能力强弱受温度影响,孵育时间有几秒钟,到30min,甚至更长,取决于探针终浓度、细胞类型、培养条件和一些其他因素。

2-NBDG案例:

Assessment of 2-NBDG as a marker of glucose metabolism in animals. a Multispectral fluorescence imaging of HT-29 subcutaneous tumors in nude mice 40 min following administration of 500 nmol of 2-NBDG in fed versus fasting states. Red arrows indicate the location of the tumor. There is a noticeable increase in 2-NBDG signal after the animal was kept NPO for 24 h. b Analysis of n =4 animals with subcutaneous tumors imaged, while fed and fasting shows a statistically significant p 0.05 increase in 2-NBDG uptake in fasting animals. c Statistically significant p 0.05 increase in 2-NBDG signal in the brain of an animal experiencing generalized seizures induced by injection of pilocarpine i.p. versus control. These data suggest that 2-NBDG localization reflects true glucose utilization rather than nonspecific extravasation.  


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