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每日科研进展 l 2023.07.05 l

2023-07-06 10:05 作者:RNA生物农药  | 我要投稿


果蝇X病毒样颗粒DXV作为有效的dsRNA载体用于改进果蝇的RNAi

RNA干扰(RNAi)已被开发为一种有前途的害虫控制策略,其对于防控斑翅果蝇(SWD)具有巨大的潜力。

然而,由于通过取食摄入无保护的双链RNA(dsRNA)在D. suzukii中诱导RNAi很差,因此建立dsRNA递送的有效策略仍然是必要的。

在这项研究中,开发了来源于果蝇X病毒(DXV)的新型病毒样颗粒(VLPs),并研究了它们在体外培养的昆虫细胞和体内活的昆虫中递送dsRNA的能力。

首先,DXV的多蛋白在C-末端与eGFP或Myc-tag融合,能够以类似于真实病毒体的球形自组装成VLP。然后,通过拆卸/重组策略将dsRNA分子加载到DXV-VLPs中,并证明部分保护其免受D. suzukii体液中的降解。


图 1. 在昆虫细胞中产生DXV-VLPs的重组杆状病毒


图 2. 蔗糖梯度超速离心纯化Hi5细胞中的VLPs

此外,DXV-VLPs能够将dsRNA有效地携带到果蝇S2细胞和斑翅果蝇成虫中。通过靶向D. suzukii成虫中必需的vha26基因,与DXV-VLP::dsGFP和未保护的dsvha26(死亡率低于17%,无沉默)相比,DXV-VLP::dsvha26复合物可以诱导更高的死亡率(46%)和基因沉默(36%)。


图 3.通过re-/dis组装策略将dsRNA封装到DXV-VLP中的效率


图 4. 体内实验分析DXV-VLPs作为dsRNA递送载体到D.suzukii成虫中的能力

这项研究表明,基于昆虫病毒的VLP可以作为dsRNA递送到昆虫中的纳米载体,并为基础研究和害虫防治提供改进RNAi的工具。


原文链接:

https://doi.org/10.1007/s10340-023-01645-1


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