光谱分析法含量测定的内容

一、紫外-可见分光光度法

        是基于物质分子对紫外光区和可见光区的单色光辐射的吸收特性建立的光谱分析方法。

二、方法特点

1、简便易行：本法使用的仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。

2、灵敏度高：本法灵敏度可达10-6g/ml，适用于低浓度试样的分析。

3、准确度高：本法的相对误差不大于2%，适用于对测定结果的准确度有较高要求的试样的分析。

4、专属性较差：本法通常不受一般杂质的干扰，但对结构相近的有关物质缺乏选择性。

三、基础为朗伯-比尔定律，如下图所示

四、含量测定的方法可分为四种

对照品比较法、吸收系数法、计算光度法、比色法，以前两个为举例；

1、对照品比较法：

       按各品种项下的方法，分别制备供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分规定量的100%±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下图公式计算。

其中Cx为供试品溶液的浓度、Ax为供试品溶液的吸光度、Cr为对照品溶液的浓度、Ar为对照品溶液的吸光度。

固体制剂的含量测定如下图所示

2、吸收系数法：

       按各品种项下的方法制备供试品溶液，在规定的波长处测定其吸光度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。供试品溶液浓度如下图所示。

方法特点

1、高灵敏度：荧光分光光度法的灵敏度一般较紫外风光光度法更高其灵敏度可达10-9g/ml。

2、荧光自熄火：当溶溶液中荧光物质的浓度太高时，溶液会发生自熄灭现象，同时由于在液面附近的溶液会吸收激发光，使发射光强度降低，导致荧光强度与浓度不成正比。

3、易受干扰：荧光分光光度法因灵敏度高，故干扰因素多，因此必须做空白实验。

方法：

       由于不宜测定绝对荧光强度，通常荧光分光光度法是在一定条件下，测定对照品溶液的荧光强度与其浓度的线性关系。当线性关系良好时，可在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度，然后在相同条件下，分别读取对照品溶液及其试剂空白的荧光强度与供试品溶液及其试剂空白的荧光强度，用下图方法计算。

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