01定义

gDNA：是指有机体在单倍体状态下的DNA全部含量。广义的基因组也指某一体系中的DNA，它包括编码或细胞中固有的核糖体DNA、线粒体DNA、tRNA基因及其它RNA编码。基因组脱氧核糖核酸是染色体DNA，这一概念与染色体外DNA（如质粒）相对，常简写为gDNA。

02核酸的提取

 核酸的分类

1. DNA：主要存在于细胞核的染色体中。核外也有少量DNA，如线粒体DNA（mtDNA）,叶绿体DNA（cpDNA），质粒DNA。2. RNA：存在于细胞质中，如mRNA，rRNA，tRNA等。

除上述DNA，RNA外，还有非细胞形式存在的病毒和噬菌体，其或只含DNA,或只含有RNA.

分离纯化核酸的原则

 1. 保持核酸一级结构的完整性。

2. 去除其他杂质保证核酸的纯度（去除与核酸结合的蛋白质、多糖和脂类等大分子，沉淀不需要的核酸分子）。

核酸纯化应达到的要求

1. 核酸样本中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；

2. 其他生物大分子的污染应降到最低程度；

3. 排除其他核酸分子的污染。

DNA的提取通常遵循三个基本步骤

1. 裂解宿主细胞。

2. 将DNA与其他细胞成分分离。

3. 分离脱氧核糖核酸。

三种方法来从血液中提取基因组DNA

1. 苯酚提取，从水相中抽提变性的蛋白质，抑制DNase的降解作用。这种方法非常耗时，试剂可能有毒并危及健康。

 2. 异丙醇沉淀、非有机溶剂萃取、甲酰胺裂解物法和玻璃颗粒吸附法，对于从冷冻，痕量和干燥的血液中提取基因组DNA方面无效；

 3.  非酶盐析法和微球法，与传统法相比，这些方法具有成本效益，耗时更少，并且产生更大量的DNA。

03 gDNA应用

构建基因组文库

RFLP分析

DNA是遗传信息的载体，是分子生物学研究的主要对象，因此DNA的提取也是分子生物学实验技术中最重要的操作。

魏祎 | 文案
 

文中配图源于网络  侵删
 

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