限制性内切酶如何用于制造重组DNA

重组 DNA 是一种人工类型的 DNA，通过组合两个或多个物种的 DNA 产生。 制造重组 DNA 的过程称为分子克隆。 分子克隆的基本过程包括分离DNA、切割DNA、连接DNA和扩增重组DNA。 将感兴趣的基因插入载体中，该载体作为感兴趣基因的载体分子。 该载体与感兴趣的基因一起被称为重组 DNA。 限制性内切酶在基因克隆中的主要作用是切割 DNA。 使其适用于 DNA 操作的限制性内切酶的关键特征是它们可以在特定目标处切割 DNA。 这允许产生用于连接目的的所需DNA片段。

什么是限制性内切酶？

限制性内切酶是一种内切酶，可识别称为限制性内切位点的短而特定的DNA序列，并在该位点切割DNA。它们是一种由细菌产生的生化剪刀。限制性内切酶保护细菌免受噬菌体侵害。这些酶是从细菌中分离出来的，用于在实验室中切割DNA。限制性内切酶的作用如图所示。

限制性内切酶在精确位置切割 DNA 的能力使研究人员能够从基因组 DNA 中分离出含有基因的片段。 可以将这些片段插入载体以产生重组 DNA 分子。

限制性内切酶如何用于制造重组DNA？

重组DNA是由两个或两个以上物种的DNA组成的DNA分子。它主要包括来自供体物种的感兴趣的基因和将目的基因携带到宿主细胞的载体。生产重组DNA分子的主要步骤是DNA分离，用限制性内切酶消化，将目的基因连接到载体上，以及扩增宿主细胞内的重组DNA分子。整个过程被称为分子克隆。分子克隆如图所示。