常见的几种脂质染色方法，你选哪一种？

脂质如何染色？小薇今天简单为大家介绍一下常见的脂质染色方法。

脂质是构成人体组织的正常成分，包括脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇等），通常不溶于水而易溶于酒精、氯仿等脂溶剂。

最常见的脂质染色方法包括苏丹III染色、苏丹IV染色、苏丹黑和油红O染色。一般用于病理状态下组织脂肪的检测。正常状态下，除脂肪细胞外其他细胞内不见或少见少量脂滴，但在病理状态下，正常细胞中会出现脂滴或者脂滴明显增多，尤其是心、肝、肾等实质器官发型脂肪病变时，胞浆内出现大小不一的空泡，此时需用脂肪染色鉴定空泡是为脂肪变性、水变性还是糖原贮存。

#01苏丹III染色

1、原理

苏丹（Sudan）III，最早使用的脂肪染料，具有脂溶性，易穿过细胞膜进入脂肪细胞内与脂肪反应显橘黄色。

2、结果

脂肪呈橘黄色或鲜红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。一般用于确定胞浆内空泡是脂滴、糖原还是水变性。

3、大致染色步骤

1：准备冰冻切片（8-10μm）；

2：70%酒精固定1min；

3：苏丹III酒精溶液染色20-30min；

4：70%酒精洗去多余染料；

5：水洗；

6：苏木素复染2-5min；

7：1%盐酸酒精分化；

8：水洗、蓝化、甘油封固。

#02苏丹IV染色

1、原理

苏丹IV又名猩红，是苏丹III的衍生物，可将脂肪染成红色，也能将角质化的细胞壁及脂肪、挥发油等染成红色。

2、结果

脂肪呈猩红色，比苏丹III更为清晰。

3、步骤与苏丹III染色一致。

#03油红O染色

1、原理

油红O（Oil Red O）为脂溶性染料，可在脂肪内高度溶解。油红O可以特异性地与组织和细胞内的重型甘油三酯、脂质和脂蛋白产生吸附以使脂肪染色。分子式如下：

油红O染色的观察性好，染色更深，是目前最优良的脂肪染色燃料，进行脂肪染色时，标本不能制作石蜡切片，而需要冰冻切片。

油红O除了可用于脂肪染色，也可用于法医鉴定指纹。

2、结果

脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。

3、步骤

1：准备冰冻切片（8-10μm）；

2：70%酒精固定1min；

3：蒸馏水洗；

4：油红稀释染液10-15min，避光密封；

5：60%酒精镜下分化至间质清晰；

6：蒸馏水洗；

7：Marry氏苏木素复染核；

8：水洗，甘油或甘油明胶封片。

脂肪染色方法简单，结果也比较好解读。组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好，因而在实际操作中，可以适当提高温度（37℃-60℃）以便更好地观察染色结果。

小方法成就大文章，祝大家科研之路一切顺利！