植物全钙、镁的测定-上海液质检测平台

植物全量钙、镁测定样品的分解，可用干灰化法和湿灰化法。湿灰化法，如果采用HNO3—HClO4—H2SO4三酸消煮法，并且同时测定磷、钾时要注意镁和钙转化为难溶的CaSO4，而且SO₄²⁻浓度太高时，对EDTA配合滴定或原子吸收分光光度法测定钙都会带来影响。因此，钙、镁的测定，以采用干灰化法为好。也可采用1mol·L~/HCl浸提法测定钙、镁和微量元素。

溶液中钙、镁的测定，目前都用EDTA配合滴定法或原子吸收分光光度法。

植物样品中含磷量比较高，特别是种子中含磷很高而钙、镁较少，因此，在测定全钙、镁时必须考虑解决磷的干扰问题。而用原子吸收分光光度法测定钙、镁是一个快速而准确的方法，应用得比较普遍。

 一、EDTA配合滴定法

 方法原理

植物样品经干灰化后用稀盐酸煮沸，溶解灰分中的钙和镁。待测溶液中Ca2+和Mg2+用EDTA直接滴定法测定。对含磷较高的植物种子样品则须用EDTA反滴定法，以免在碱性溶液中生成磷酸钙而造成负误差。

 主要仪器 ： 马福炉、瓷坩锅（30mL）、半微量滴定管。

 试剂

（1）三乙醇胺（1∶1）溶液。

（2）4mol·L-1NaOH溶液。称氢氧化钠（化学纯）16.0g溶于100mL水中。

（3）0.01 mol·L-1 EDTA标准溶液。取EDTA二钠盐3.720g溶于无二氧化碳水中，微热溶解，冷却后定容为1L。用标准Ca2*溶液标定，方法同测定Ca2+。溶液贮于塑料瓶中。

（4）标准Ca2+溶液。准确称取在105℃下烘干4～6h的CaCO（分析纯）0.5004g溶于0.5mol·L '盐酸溶液25mL中，煮沸除去二氧化碳，瓶用无二氧化碳水洗入500mL容量瓶中，定容。该溶液的浓度为0.01mol·L-1（Ca2*）。

（5）氨缓冲溶液（pH=10）。取NHCl溶于200mL水中加入浓氨水（化学纯）570mL，用水稀释至1L，贮于塑料瓶中，并注意防止吸收空气中的二氧化碳。

（6）K-B指示剂。先取KSO（无水）研细，再分别取酸性铬黑K 【2-（2-羟基-5-磺酸钠-偶氮苯）-1，8-二羟基-3，6萘二磺酸钠盐0.5g和1g萘酚绿B研细，将三者混匀，贮于塑料瓶中，不用时放在干燥器中保存。

 操作步骤  

进行灰化，冷却后用少量水湿润灰分，然后小心滴加HCl约20mL，慎防灰分飞溅损失，加热至沸以溶解残渣。用热水将其无损地洗入100mL容量瓶中，冷却后定容过滤，滤液备用。

（1）直接滴定法（适用于一般茎叶样品）。

钙的测定吸收上述待测液10mL（含钙1～5mg），放入150mL三角瓶中，用水稀释至50mL，加入1∶1三乙醇胺2mL，摇匀，再加4mol·L NaOH2mL，摇匀放置2min待Mg（OH）2沉淀后立即加入K-B指示剂0.1~0.2g，用0.01mol·L-|EDTA标准溶液滴定至紫红色突变为蓝绿色为终点。

钙+镁总量的测定∶另取上述待测液10mL（含钙1~5mg），放入150mL三角瓶中，用水稀释至50mL，加入1∶1三乙醇胺2mL，摇匀，再加氨缓冲液5mL，摇匀。加入K-B指示剂0.1~0.2g，用0.01mol·L-'EDTA标准溶液滴定至紫红色突变为蓝绿色为终点。

结果计算Ⅰ

（2）反滴定法（适用于一般种子样品）

钙的测定吸收上述待测液10mL（含钙1～5mg），放入150mL三角瓶中，用水稀释至50mL，加入1∶1三乙醇胺2mL，摇匀，再加4mol·L NaOH2mL，摇匀放置2min待Mg（OH）；沉淀后立即加入K—B指示剂0.1～0.2g，加入0.01mol·L-'EDTA标准溶液10mL，此时溶液呈蓝色，然后用0.01mol·L-1Ca标准溶液反滴定过剩的EDTA，终点为蓝绿色突变为紫红色。

同时做钙空白标定∶吸取空白液10mL（即1.2mol·L HCl约20mL的稀释液）同上步骤进行滴定。

钙+镁总量的测定另取上述待测液10mL（约含钙1～5mg），放入150mL三角瓶中，用水稀释至50mL，加入1∶1三乙醇胺2mL，摇匀，再加氨缓冲液5mL，摇匀。加入K-B指示剂0.1~0.2g，加入0.01mol·L-LEDTA标准溶液10mL，此时溶液呈蓝色，然后用0.01mol·L-1Ca标准溶液反滴定过剩的EDTA，终点为蓝绿色突变为紫红色。

同时做钙+镁空白标定∶吸取空白液10mL（即1.2mol·L-'HCl约20mL 的稀释液）同上步骤进行滴定。

结果计算Ⅱ

二、原子吸收分光光度法（AAS法）

 方法原理  

钙镁是原子吸收经常测定的元素。可用AAS测定。

 主要仪器：原子吸收分光光度计，火焰光度计

试剂

（1）100μg*mL-1钙标准溶液。

（2）10μg*mL-'镁标准溶液。

（3）50gL-1氯化锶或氯化镧溶液。

 操作步骤

吸取中经过滤待测液2～10mL（含钙0.1～0.5mg，镁0.01～0.05mg）于50mL容量瓶中，加入50g·L~l氯化锶或氯化镧溶液1mL（**）。水定容后用原子吸收分光光度计分别测定钙和镁的含量。其测定条件请查阅仪器说明书。

标准曲线制作。分别吸取100μg·L |丨钙标准溶液和10μg·mL~'镁标准溶液0、1、2、3、4、5mL，分别将其至于6个50mL三角瓶中，然后吸取待测溶液相同体积的空白酸液（即1.2mol·L-1HCl约20mL的稀释液）（性2），再各加入50g·L二】氯化锶或氯化镧溶液1mL，水定容，即得0、2、4、6、8、10μg ·mL-1Ca和0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg·mL-1Mg混合标准系列溶液。用原子吸收分光光度计测定。绘制钙和镁的标准曲线。

 结果计算

 

注释

注1.空气/乙炔火焰中测定钙，它是受多种化学干扰的典型。其中的主要干扰物质为硅酸盐、铝酸盐、磷酸盐和硫酸盐，它们都会降低钙的灵敏度。在样品溶液和标准溶液中加入50μg·L=1的La（镧）或Sr（锶），其最终浓度为1000μg·mL-1，就能控制高达500μg·mL-'硅和1000g-mL-'铝或磷酸盐的影响。镁一般受其它元素的干扰，仅有硅和铝降低镁的吸收，加入1～10g·L-1 La，一般就可以消除这此干扰。

注2.溶解时用酸量对钙和镁的测定也有影响，应尽量保持标准溶液和样品溶液的酸浓度和离子组成一致。