研究miRNA,到底是研究5p成熟体还是3p成熟体呢?
我们在研究miRNA的时候,比如hsa-miR-296,但在查找序列时,发现有hsa-miR-296有两个成熟体,hsa-miR-296-3p和hsa-miR-296-5p,可是文献中一般只会说hsa-miR-296,这样的话到底是做哪个?是3p还是5p呢?
这里,汉恒生物小编就和大家说说miRNA的3p和5p之间的区别。
首先,什么是miRNA呢?
miRNA (microRNA)是一组由基因组编码的长度约20~25个核苷酸的非编码RNA,通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。在miRNA公共数据库miRBase (http://www.mirbase.org/)中已经有1W多条来自不同物种的miRNA序列。
那它是怎么来的呢?
是由约70个碱基大小形成发夹结构的单链RNA前体 (pre-miRNA),经过Dicer酶酶切加工后,成为长约20~25nt的成熟miRNA,如下图所示:
图1,miRNA结构图
有的miRNA前体两个臂分别产生一条有功能的成熟miRNA,他们分别靶向不同的位点。这时候就要来进行区分了,一般以“-5p”和“-3p”分别命名,如hsa-miR-296-5p和hsa-miR-296-3p,分别表明从hsa-mir-296前体的5’端臂和3’端臂加工而来的。表达水平较高的miRNA后面不加任何符号,而表达水平较低的miRNA后面加上*号,有时带“*”的miRNA就根本不出现。但对于hsa-miR-296-3p和hsa-miR-296-5p则都没有带*号,表明两个成熟体都有可能存在且表达量都不低。
而发夹状结构的miRNA前体转录本以“mir”命名,其编号以“MI”编号,如人的miRNA296的前体ID为hsa-mir-296,Accession为MI0000747。如下图所示。
图2,hsa-mir-296前体
图3,hsa-mir-29b-1成熟体
所以针对最初问题,可以从两个途径来确定:
查文献:
如果参考的文献中有他所用的hsa-miR-296序列或者Accession number,直接拿序列与现在的hsa-miR-296-5p以及hsa-miR-296-3p比较即可,这样最准确;
2. 查mirbase数据库:
如果参考的文献没有给出具体序列,只是写hsa-miR-296,那上mirbase数据库查hsa-miR-296,虽然他会列出hsa-miR-296-5p以及hsa-miR-296-3p两个不同的miRNA成熟体,但在下面有写Previous IDs,这样就能知道之前的hsa-miR-296是现在的5p还是3p(如上图所示),显然这里是指的hsa-miR-296-5p。
以上就是两个miRNA成熟体的选择方法,如果有其他的疑问,欢迎咨询汉恒生物!