艾美捷T7 RNA聚合酶特性介绍
T7 RNA聚合酶在合成RNA的过程中,需要DNA模板与镁离子(Mg2+)作为辅因子。牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)及精胺(spermidine)对此酶具促进效果。与细菌的RNA聚合酶的差异之一,在于T7RNA聚合酶不受抗生素立泛霉素(rifampicin)抑制。
艾美捷T7 RNA聚合酶是一种DNA依赖性RNA多聚酶(99kDa),对含有T7噬菌体启动子的DNA序列的体外RNA合成进行催化。高浓缩版T7 RNA聚合酶HC非常适合建立和优化高产量的体外转录反应。所提供的T7 IVT设置缓冲液、MgCl2和DTT溶液能够测试不同的反应条件,例如核苷酸/MgCl2浓度。
噬菌体T7 RNA聚合酶是一种DNA依赖性RNA多聚酶(99kDa),对含有T7噬菌体启动子的DNA序列的体外RNA合成进行催化。
高浓缩版T7 RNA聚合酶HC非常适合建立和优化高产量的体外转录反应。所提供的T7 IVT设置缓冲液、MgCl2和DTT溶液能够测试不同的反应条件,例如核苷酸/MgCl2浓度。
具有最小优化的分析设置建议:HighYield T7 RNA合成试剂盒(#RNT-101)。
艾美捷T7 RNA聚合酶活性:
1μl T7 RNA聚合酶HC在37°下10分钟内产生>/=30μg RNA。这相当于1000 U NEB的T7 RNA聚合酶(高浓度),#M0460T(活性测定条件:1x T7 IVT建立缓冲液,补充10 mM DTT、12 mM MgCl2、3 mM NTPs、1μl T7 RNA聚合酶HC和1μg DNA模板(1.4 kpb RNA转录物),20μl。用荧光微板测定法测定RNA产量。)
艾美捷T7 RNA聚合酶组分:
T7 RNA聚合酶HC
1x 50μl(2μg/μl)
50 mM Tris-HCl、1 mM EDTA、100 mM NaCl、5 mM DTT、0.1%Triton-X-100、50%甘油(v/v),pH 8.0
